人乳鐵蛋白是一種重要的藥用保健蛋白,需經(jīng)過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體加工后才具備活性。如圖表示利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人乳鐵蛋白的部分過程,圖中Tetr表示四環(huán)素抗性基因,Ampr表示氨芐青霉素抗性基因,五種限制酶的識別序列及切割位點如表所示?;卮鹣铝袉栴}:
限制酶 |
BamHⅠ |
HaeⅢ |
BclⅠ |
Sau3AⅠ |
NotⅠ |
識別序列及切割位點 |
G↓GATCC CCTA↑GG |
GG↓CC CC↑GG |
T↓GATCA ACTAG↑T |
↓GATC CTAG↑ |
GC↓GGCCGC CGCCGG↑CG |
(1)圖中質(zhì)粒上的Amp
r和Tet
r是
標(biāo)記基因
標(biāo)記基因
,作用是
篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞
篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞
。
(2)若選用牛作為轉(zhuǎn)基因動物,可通過
顯微注射
顯微注射
方法將基因表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵中,然后使其發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動物。
(3)據(jù)圖分析,篩選含有重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞首先需要在含
氨芐青霉素
氨芐青霉素
的培養(yǎng)基上進(jìn)行,能在該培養(yǎng)基生長的受體細(xì)胞可能已經(jīng)導(dǎo)入重組質(zhì)粒。
(4)要將人乳鐵蛋白基因插入質(zhì)粒,若只允許使用一種限制酶,應(yīng)選擇的限制酶是
Sau3AⅠ
Sau3AⅠ
若BamHⅠ酶切的DNA末端與BclⅠ酶切的DNA末端連接起來,形成有6個堿基對序列的連接部位,對于該部位,這兩種酶
都不能
都不能
(填“都不能”或“只有一種能”)切開。
(5)利用轉(zhuǎn)基因大腸桿菌(工程菌)不能生產(chǎn)有活性的人乳鐵蛋白,這是因為
大腸桿菌為原核生物,無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,不具備加工人乳鐵蛋白的能力
大腸桿菌為原核生物,無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,不具備加工人乳鐵蛋白的能力
。