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人乳鐵蛋白是一種重要的藥用保健蛋白,需經(jīng)過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體加工后才具備活性。如圖表示利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人乳鐵蛋白的部分過程,圖中Tetr表示四環(huán)素抗性基因,Ampr表示氨芐青霉素抗性基因,五種限制酶的識別序列及切割位點如表所示?;卮鹣铝袉栴}:
限制酶 BamHⅠ HaeⅢ BclⅠ Sau3AⅠ NotⅠ
識別序列及切割位點 G↓GATCC
CCTA↑GG
GG↓CC
CC↑GG
T↓GATCA
ACTAG↑T
↓GATC
CTAG↑
GC↓GGCCGC
CGCCGG↑CG
菁優(yōu)網(wǎng)
 (1)圖中質(zhì)粒上的Ampr和Tetr
標(biāo)記基因
標(biāo)記基因
,作用是
篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞
篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞
。
(2)若選用牛作為轉(zhuǎn)基因動物,可通過
顯微注射
顯微注射
方法將基因表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵中,然后使其發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動物。
(3)據(jù)圖分析,篩選含有重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞首先需要在含
氨芐青霉素
氨芐青霉素
的培養(yǎng)基上進(jìn)行,能在該培養(yǎng)基生長的受體細(xì)胞可能已經(jīng)導(dǎo)入重組質(zhì)粒。
(4)要將人乳鐵蛋白基因插入質(zhì)粒,若只允許使用一種限制酶,應(yīng)選擇的限制酶是
Sau3AⅠ
Sau3AⅠ
若BamHⅠ酶切的DNA末端與BclⅠ酶切的DNA末端連接起來,形成有6個堿基對序列的連接部位,對于該部位,這兩種酶
都不能
都不能
(填“都不能”或“只有一種能”)切開。
(5)利用轉(zhuǎn)基因大腸桿菌(工程菌)不能生產(chǎn)有活性的人乳鐵蛋白,這是因為
大腸桿菌為原核生物,無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,不具備加工人乳鐵蛋白的能力
大腸桿菌為原核生物,無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,不具備加工人乳鐵蛋白的能力
。

【答案】標(biāo)記基因;篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞;顯微注射;氨芐青霉素;Sau3AⅠ;都不能;大腸桿菌為原核生物,無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,不具備加工人乳鐵蛋白的能力
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/8/14 2:0:1組卷:5引用:2難度:0.6
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  • 菁優(yōu)網(wǎng)1.限制酶a、限制酶b能將某線性DNA分子片段切割,其識別序列和切割位點如圖所示。下列敘述錯誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/10 15:30:3組卷:21引用:5難度:0.7
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    。
    (2)為篩選PDC基因的調(diào)控蛋白,科研人員進(jìn)行了下列實驗。
    ①PDC基因的啟動子序列未知,為獲得大量該基因啟動子所在片段,可利用限制酶將基因組DNA進(jìn)行酶切,然后在
     
    的作用下將已知序列信息的接頭片段連接在PDC基因的上游,根據(jù)
     
    和PDC基因編碼序列設(shè)計引物進(jìn)行PCR.利用質(zhì)粒A(圖1)構(gòu)建含有PDC基因啟動子片段的重組質(zhì)粒并導(dǎo)入代謝缺陷型酵母菌,用不含
     
    的培養(yǎng)基可篩選出成功轉(zhuǎn)化的酵母菌Y1H。
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    ②質(zhì)粒G(圖2)上的AD基因表達(dá)出的AD蛋白與啟動子足夠靠近時,能夠激活后續(xù)基因轉(zhuǎn)錄,因此需獲得待測蛋白與AD蛋白的融合蛋白用于后續(xù)篩選??蒲腥藛T從中國甜柿中提取RNA,將逆轉(zhuǎn)錄形成的各種cDNA與質(zhì)粒G連接后導(dǎo)入酵母菌,此時應(yīng)選擇質(zhì)粒G中的位點
     
    (填序號1~5)作為cDNA的插入位點,最終獲得攜帶不同cDNA片段的酵母菌群Y187。
    ③重組酵母Y187與Y1H能夠進(jìn)行接合生殖,形成的接合子含有兩種酵母菌質(zhì)粒上的所有基因。若接合子能在含有金擔(dān)子素的培養(yǎng)基中生存,則推測待測蛋白是PDC基因的調(diào)控蛋白,請結(jié)合圖示闡述作出該推測的理由。

    發(fā)布:2024/11/11 0:0:2組卷:82引用:2難度:0.7
  • 3.某一質(zhì)粒載體如圖甲所示,Ampr表示氨芐青霉素抗性基因,Tett表示四環(huán)素抗性基因。有人將此質(zhì)粒載體用BamHⅠ酶切后,與用BamHⅠ酶切獲得的目的基因混合,加入DNA連接酶進(jìn)行連接反應(yīng),用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化后得到多種大腸桿菌,并利用培養(yǎng)基乙和丙篩選出導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌。下列敘述錯誤的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/11/10 9:0:1組卷:59引用:4難度:0.6
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