番茄黃化曲葉病毒（TYLCV）是一類單鏈環(huán)狀DNA病毒，能引發(fā)番茄黃化曲葉病。檢測某番茄幼苗是否感染該病毒，實驗人員進行以下操作：
①分析PCR擴增結果；②從番茄幼苗組織樣本中提取DNA；③采集番茄幼苗葉片組織樣本；④利用PCR擴增DNA片段。
完成下列問題：
（1）正確的操作順序是 ③②④①③②④①（用數(shù)字序號表示）。
（2）操作②在番茄研磨液中加入2mol/L的氯化鈉，作用是 溶解DNA溶解DNA；研磨液中的乙二胺四乙酸二鈉（EDTA）的作用是 抑制DNA酶活性，防止DNA被酶解抑制DNA酶活性，防止DNA被酶解。
（3）操作④中使用的酶是 耐高溫的DNA聚合酶耐高溫的DNA聚合酶。PCR反應中每次循環(huán)可分為 變性變性、退火、延伸三步。
（4）PCR擴增得到的產物進行瓊脂糖凝膠電泳后的結果如下：
注：M：DNA marker；1-4：空白對照、陰性對照、陽性對照、樣品
實驗中，DNA marker是一組已知長度和含量的標準DNA片段的混合物，起 參照參照作用。健康番茄幼苗的DNA是陰性對照組，TYLCV的DNATYLCV的DNA是陽性對照組。若想利用該樣品植株獲得無病毒的番茄幼苗，方法是 取莖尖、芽尖等幼嫩組織部位進行植物組織培養(yǎng)取莖尖、芽尖等幼嫩組織部位進行植物組織培養(yǎng)。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】③②④①；溶解DNA；抑制DNA酶活性，防止DNA被酶解；耐高溫的DNA聚合酶；變性；參照；TYLCV的DNA；取莖尖、芽尖等幼嫩組織部位進行植物組織培養(yǎng)
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：24引用：4難度：0.7
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1．以下是有關分離與鑒別DNA的技術，其中說法正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/15 16:30:6組卷：5引用：1難度：0.5 -
2．科研人員克隆了豬白細胞抗原基因（SLA-2基因），構建了該基因的真核表達載體，進行了豬腎上皮細胞表達研究。實驗的主要流程如圖1，SLA-2基因長度為1100bp,質粒B的總長度為4445bp,其限制酶切點后的數(shù)字表示距復制原點的距離。請回答：
（1）過程①中，PCR擴增SLA-2的原理是限制酶 BclⅠ NotⅠ XbaⅠ San3AⅠ 識別序列及切割位點 T↓GATCA GC↓GGCCGC T↓CTAGA ↓GATC ，下列4種引物中應選擇的是。
a 5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
b 5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
c 5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
d 5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
（2）過程②將重組質粒導入大腸桿菌的目的是，該過程需要用處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細胞。然后將大腸桿菌涂布在含有（抗生素）的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。
（3）若用Sau3AⅠ和XbaⅠ完全酶切質粒C后電泳，請在答題紙相應位置畫出可能得到的電泳條帶。
（4）科研中常用呤霉素對真核細胞進行篩選，一般選擇最低致死濃度的前一個濃度作為篩選濃度的原因是：既可以讓大部分沒有抗性的細胞死亡又不會讓。實驗結果如圖2，根據(jù)實驗結果最佳的嘌霉素篩選濃度為。
（5）過程⑦研究人員用小鼠抗SLA抗原肽單克隆抗體檢測腎上皮細胞生產的抗原肽，其原理是，單克隆抗體能檢測其是否具有正確的，從而是否具有生物活性。
發(fā)布：2024/12/15 6:30:1組卷：41引用：3難度：0.6 -
3．下列關于“DNA片段的擴增及電泳鑒定”的實驗，說法錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/15 6:30:1組卷：3引用：1難度：0.6
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