為探究M基因的功能，科研人員將克隆得到的M基因導入擬南芥植株（自交繁殖），流程如下圖所示?；卮鹣铝袉栴}：

（1）研究人員獲取了M基因的mRNA后，通過[a]

逆轉錄

逆轉錄

（填名稱）過程獲得了M基因；然后通過[b]

PCR

PCR

技術對其進行擴增。
（2）過程c獲得重組質粒，需要使用的工具酶是

限制酶和DNA連接酶

限制酶和DNA連接酶

。
（3）為獲得轉基因植物，本實驗采用

農桿菌轉化

農桿菌轉化

法將重組質粒導入擬南芥，主要過程如下：
①過程d：將重組質粒導入農桿菌，得到含重組質粒的農桿菌菌液。
②過程e：在擬南芥植株產生大量花序時，將其花表面部分在農桿菌懸浮液中浸泡20～30s,3～4周后得到轉化擬南芥植株的種子T。浸泡之前，需先剪去已經長成的角果（這些角果將來可發(fā)育成種子），原因是

已受精的角果將來結的種子是非轉基因

已受精的角果將來結的種子是非轉基因

。
③將收獲的擬南芥T。種子，播種在含有

卡那霉素

卡那霉素

的培養(yǎng)基上，能的康生長的幼苗含有M基因。
（4）若采用上述方法獲得的擬南芥細胞中只有一條DNA上含有M基因，則要進一步獲得M基因穩(wěn)定的轉基因擬南芥植株，下一步操作是

自交

自交

。