重疊延伸PCR技術(shù)是采用具有互補(bǔ)末端的引物,使PCR產(chǎn)物形成了重疊鏈,從而在隨后的擴(kuò)增反應(yīng)中通過重疊鏈的延伸,將不同來源的擴(kuò)增片段重疊拼接起來的技術(shù),可通過定點(diǎn)誘變在體外改造DNA分子,并將改造后的目的基因?qū)胭|(zhì)粒構(gòu)建目的基因表達(dá)載體。
(1)如圖所示的重疊延伸PCR技術(shù)中,PCR1的引物是 引物A、引物C引物A、引物C。PCR4可獲得大量定點(diǎn)誘變目的基因,此時(shí)的引物為 引物C、引物D引物C、引物D。PCR3時(shí)模板DNA不能選擇DNA分子③的原因是 子鏈的延伸方向只能從5’→3',以DNA分子③作模板時(shí)子鏈不能延伸子鏈的延伸方向只能從5’→3',以DNA分子③作模板時(shí)子鏈不能延伸。
(2)為使重疊延伸PCR技術(shù)改造后的目的基因(該基因序列不含圖中限制酶的識(shí)別序列)能與載體正確連接,PCR4時(shí),應(yīng)在基因上、下游引物的 5′5′端分別添加限制酶 KpnⅠ、EcoRⅠKpnⅠ、EcoRⅠ的酶切位點(diǎn)。
(3)將目的基因、質(zhì)粒及大腸桿菌混合,溫育一段時(shí)間后涂在含四環(huán)素的平板上培養(yǎng),一段時(shí)間后平板上長出菌落。這些菌落的菌體內(nèi) 不一定不一定(填“一定”、“不一定”)含有目的基因,理由是 含有空白質(zhì)粒的大腸桿菌也能在該培養(yǎng)上生長含有空白質(zhì)粒的大腸桿菌也能在該培養(yǎng)上生長。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定;基因工程的操作過程綜合.
【答案】引物A、引物C;引物C、引物D;子鏈的延伸方向只能從5’→3',以DNA分子③作模板時(shí)子鏈不能延伸;5′;KpnⅠ、EcoRⅠ;不一定;含有空白質(zhì)粒的大腸桿菌也能在該培養(yǎng)上生長
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:46引用:2難度:0.7
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1.科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對(duì)CO2的親和力,利用PCR定點(diǎn)突變技術(shù)改造Rubisco酶基因,從而顯著提高了植物的光合作用速率。請(qǐng)回答下列問題:
(1)PCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于
(2)PCR過程所依據(jù)的原理是
(3)目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為
(4)另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中,經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是
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D.將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植(克?。?,可以獲得多個(gè)具有外源基因的后代發(fā)布:2025/1/16 8:0:1組卷:14引用:2難度:0.6 -
2.數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對(duì)定量技術(shù),其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是( )
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