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重疊延伸PCR技術(shù)是采用具有互補(bǔ)末端的引物,使PCR產(chǎn)物形成了重疊鏈,從而在隨后的擴(kuò)增反應(yīng)中通過重疊鏈的延伸,將不同來源的擴(kuò)增片段重疊拼接起來的技術(shù),可通過定點(diǎn)誘變在體外改造DNA分子,并將改造后的目的基因?qū)胭|(zhì)粒構(gòu)建目的基因表達(dá)載體。

(1)如圖所示的重疊延伸PCR技術(shù)中,PCR1的引物是
引物A、引物C
引物A、引物C
。PCR4可獲得大量定點(diǎn)誘變目的基因,此時(shí)的引物為
引物C、引物D
引物C、引物D
。PCR3時(shí)模板DNA不能選擇DNA分子③的原因是
子鏈的延伸方向只能從5’→3',以DNA分子③作模板時(shí)子鏈不能延伸
子鏈的延伸方向只能從5’→3',以DNA分子③作模板時(shí)子鏈不能延伸
。
(2)為使重疊延伸PCR技術(shù)改造后的目的基因(該基因序列不含圖中限制酶的識(shí)別序列)能與載體正確連接,PCR4時(shí),應(yīng)在基因上、下游引物的
5′
5′
端分別添加限制酶
KpnⅠ、EcoRⅠ
KpnⅠ、EcoRⅠ
的酶切位點(diǎn)。
(3)將目的基因、質(zhì)粒及大腸桿菌混合,溫育一段時(shí)間后涂在含四環(huán)素的平板上培養(yǎng),一段時(shí)間后平板上長出菌落。這些菌落的菌體內(nèi)
不一定
不一定
(填“一定”、“不一定”)含有目的基因,理由是
含有空白質(zhì)粒的大腸桿菌也能在該培養(yǎng)上生長
含有空白質(zhì)粒的大腸桿菌也能在該培養(yǎng)上生長
。

【答案】引物A、引物C;引物C、引物D;子鏈的延伸方向只能從5’→3',以DNA分子③作模板時(shí)子鏈不能延伸;5′;KpnⅠ、EcoRⅠ;不一定;含有空白質(zhì)粒的大腸桿菌也能在該培養(yǎng)上生長
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:46引用:2難度:0.7
相似題
  • 1.科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對(duì)CO2的親和力,利用PCR定點(diǎn)突變技術(shù)改造Rubisco酶基因,從而顯著提高了植物的光合作用速率。請(qǐng)回答下列問題:
    (1)PCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于
     
    (填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”)??衫枚c(diǎn)突變的DNA構(gòu)建基因表達(dá)載體,常用
     
    將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞,還需用到植物細(xì)胞工程中的
     
    技術(shù),才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
    (2)PCR過程所依據(jù)的原理是
     
    。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增,若將一個(gè)目的基因復(fù)制10次,則需要在緩沖液中至少加入
     
    個(gè)引物。
    (3)目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為
     
    ??蒲腥藛T通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大,可能的原因是
     
    。
    (4)另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中,經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是
     
    。
    A.選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因?yàn)檫@種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
    B.采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
    C.人的生長激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá),說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
    D.將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植(克?。?,可以獲得多個(gè)具有外源基因的后代

    發(fā)布:2025/1/16 8:0:1組卷:14引用:2難度:0.6
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    發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:6引用:2難度:0.6
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