1．p53基因是一種抑癌基因，在惡性腫瘤患者中突變率達(dá)50%以上。與人相比，大象體內(nèi)含有多對p53基因，推測是其很少患腫瘤的主要原因。設(shè)計實驗探究人p53基因在乳腺腫瘤細(xì)胞中的作用，回答下列問題：
（1）利用PCR技術(shù)擴增p53基因。首先根據(jù)p53基因的核苷酸序列，設(shè)計并合成，其能與變性p53基因單鏈結(jié)合，在催化作用下延伸，如此循環(huán)多次。
（2）p53基因表達(dá)載體的構(gòu)建。如圖所示，表達(dá)載體上除了標(biāo)注的DNA片段外，在p53基因上游還必須擁有的DNA片段（箭頭所示）是，其作用機理是。外源p53基因插入載體中至少需要兩種工具酶，包括準(zhǔn)確切割DNA的限制性核酸內(nèi)切酶和將雙鏈DNA片段“縫合”起來的。
（3）乳腺腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)。完成倫理學(xué)審查和病人知情同意書簽署后，將患者乳腺腫瘤組織塊剪碎，制成細(xì)胞懸液在適宜的條件下培養(yǎng)。培養(yǎng)環(huán)境中所需的主要氣體包括細(xì)胞代謝必需的和維持培養(yǎng)液pH值的。保持培養(yǎng)環(huán)境處于無菌無毒條件的操作包括（答出兩點即可）。
（4）檢測p53基因表達(dá)對乳腺腫瘤細(xì)胞增殖的影響。分別將空載體和p53表達(dá)載體轉(zhuǎn)入腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)，采用特殊方法檢測細(xì)胞增殖情況，并從培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的進(jìn)行雜交，檢測p53基因翻譯成蛋白質(zhì)的情況，探索雜交帶強度與細(xì)胞增殖率相關(guān)性。

2．胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）介導(dǎo)法的主要操作過程是：將外源基因?qū)肱咛ジ杉?xì)胞，然后將轉(zhuǎn)基因的胚胎干細(xì)胞注射于受體動物胚胎后可參與受體的胚胎構(gòu)成。如圖是利用胚胎干細(xì)胞介導(dǎo)法培育出熒光小鼠的過程。回答下列問題：

（1）從水母中獲取綠色熒光蛋白基因有多種方法。將水母的全部基因用限制性內(nèi)切核酸酶切成片段，插入到載體分子中，并將所得的 轉(zhuǎn)入大腸桿菌進(jìn)行克隆保存，這些大腸桿菌的群體稱為 。
（2）②過程中用到了 酶和 酶，③過程常用 方法，⑥過程通常要對受體母鼠進(jìn)行 處理后才可進(jìn)行胚胎移植。
（3）關(guān)于受體母鼠妊娠產(chǎn)下的子代小鼠的特點，下列敘述正確的是 。
A.各細(xì)胞都有綠色熒光蛋白基因，所以全身每個細(xì)胞都有綠色熒光蛋白產(chǎn)生
B.各細(xì)胞都有綠色熒光蛋白基因，但只有部分細(xì)胞有綠色熒光蛋白產(chǎn)生
C.不是所有細(xì)胞都有綠色熒光蛋白基因，所以只有部分細(xì)胞有綠色熒光蛋白產(chǎn)生
D.該小鼠產(chǎn)生的配子中含綠色熒光蛋白基因的概率為