隨著2019-nCoV新型冠狀病毒（RNA病毒）的全球蔓延，全世界人民的人身安全受到了極大的威脅，經(jīng)濟(jì)發(fā)展也遭遇了前所未有的挑戰(zhàn)。為了盡快打贏這場防疫阻擊戰(zhàn)，如何快速、準(zhǔn)確地檢測出病毒是關(guān)鍵。目前，采用RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)檢測新冠病毒核酸是最為主流的方法。檢測步驟如下：患者的生物樣本→病毒滅活→提取核酸→RT-PCR擴(kuò)增。
（1）PCR技術(shù)是指 PCR技術(shù)是模擬體內(nèi)DNA的復(fù)制過程，在體外擴(kuò)增DNA分子的一種生物學(xué)技術(shù)PCR技術(shù)是模擬體內(nèi)DNA的復(fù)制過程，在體外擴(kuò)增DNA分子的一種生物學(xué)技術(shù)。采用RT-PCR技術(shù)檢測2019-nCoV病毒時(shí)，先要將病毒滅活，其目的是 使病毒蛋白的高級(jí)結(jié)構(gòu)受到破壞，蛋白不再有生理活性，失去感染、致病和繁殖能力使病毒蛋白的高級(jí)結(jié)構(gòu)受到破壞，蛋白不再有生理活性，失去感染、致病和繁殖能力，其次還會(huì)利用 反轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄酶把病毒RNA 反轉(zhuǎn)錄反轉(zhuǎn)錄成cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。
（2）PCR擴(kuò)增目的基因時(shí)，需要在反應(yīng)體系中加入 引物、Taq酶引物、Taq酶和cDNA模板、游離的dNTP，其特異性決定因素是 引物引物。
（3）PCR反應(yīng)中每次擴(kuò)增大體分為變性、復(fù)性和延伸三個(gè)過程，復(fù)性時(shí)引物通過 堿基互補(bǔ)配對(duì)堿基互補(bǔ)配對(duì)和模板鏈結(jié)合。
（4）PCR擴(kuò)增儀工作關(guān)鍵是控制溫度，擴(kuò)增目的基因時(shí)所用酶的酶促反應(yīng)最適溫度是 70—75℃70—75℃。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定；目的基因的篩選與獲取．
【答案】PCR技術(shù)是模擬體內(nèi)DNA的復(fù)制過程，在體外擴(kuò)增DNA分子的一種生物學(xué)技術(shù)；使病毒蛋白的高級(jí)結(jié)構(gòu)受到破壞，蛋白不再有生理活性，失去感染、致病和繁殖能力；反轉(zhuǎn)錄酶；反轉(zhuǎn)錄；引物、Taq酶；引物；堿基互補(bǔ)配對(duì)；70—75℃
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：6引用：1難度：0.7
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對(duì)定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：7引用：2難度：0.6 -
2．科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對(duì)CO2的親和力，利用PCR定點(diǎn)突變技術(shù)改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請(qǐng)回答下列問題：
（1）PCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于（填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”）?？衫枚c(diǎn)突變的DNA構(gòu)建基因表達(dá)載體，常用將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，還需用到植物細(xì)胞工程中的技術(shù)，才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
（2）PCR過程所依據(jù)的原理是。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增，若將一個(gè)目的基因復(fù)制10次，則需要在緩沖液中至少加入個(gè)引物。
（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為?？蒲腥藛T通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中，經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因?yàn)檫@種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
B．采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
C．人的生長激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá)，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植（克?。?，可以獲得多個(gè)具有外源基因的后代發(fā)布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說法錯(cuò)誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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