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常見的探針有核酸探針和蛋白質(zhì)探針。兩種探針結(jié)構(gòu)和功能均不相同,故而應用在不同的檢測中。而兩種探針的制備過程中所應用的技術也不相同。請回答下列問題。
Ⅰ、蛋白質(zhì)探針的制備。
(1)蛋白質(zhì)探針常用
單克隆抗體
單克隆抗體
技術來制備。該技術的基本流程是將
特定的抗原
特定的抗原
注射給實驗動物,獲取的脾細胞與骨髓瘤細胞融合后,用HAT培養(yǎng)基篩選培養(yǎng)對象。該篩選過程得到的雜交瘤細胞是產(chǎn)生
抗體
抗體
的雜交瘤細胞,接下來要經(jīng)過
抗體
抗體
檢測來獲得產(chǎn)生特定蛋白的雜交瘤細胞。最終將純化得到的特定蛋白結(jié)合上熒光或放射性標記,即為蛋白質(zhì)探針。
(2)上述HAT培養(yǎng)基是
液體
液體
(填“液體”或“固體”)培養(yǎng)基。融合成雜交瘤細胞后再檢測尋找產(chǎn)生特定目標蛋白的雜交瘤細胞,而不直接在脾細胞中尋找產(chǎn)生特定蛋白的B淋巴細胞的原因是
B淋巴細胞不能分裂,不具備克隆化的能力,培養(yǎng)產(chǎn)生的抗體濃度低,不足以檢測
B淋巴細胞不能分裂,不具備克隆化的能力,培養(yǎng)產(chǎn)生的抗體濃度低,不足以檢測
。
Ⅱ、不對稱PCR是利用不等量的一對引物來產(chǎn)生大量單鏈DNA(ssDNA)的方法。該方法制備的ssDNA結(jié)合上熒光或放射性標記,即為核酸探針。
菁優(yōu)網(wǎng)
(3)不對稱PCR中加入的一對引物中含量較少的被稱為限制性引物,含量較多的被稱為非限制性引物。兩者的比例通常為1:100。PCR反應的最初的若干次循環(huán)中,其擴增產(chǎn)物主要是雙鏈DNA(dsDNA),但當限制性引物消耗完后,就會產(chǎn)生大量的ssDNA。據(jù)下圖可知,最后大量獲得的ssDNA是圖中的
(填“甲”或“乙”)鏈。
(4)若反應最初有a個模板DNA分子,最初的6次循環(huán)擴增產(chǎn)生dsDNA,后10個循環(huán)均只擴增ssDNA,則需要限制性引物
2
7
-
2
a
2
2
7
-
2
a
2
個。請繪制這16個循環(huán)中ssDNA的分子數(shù)量隨循環(huán)次數(shù)的變化圖2。(說明:縱軸的刻度請自行標注。)
【答案】單克隆抗體;特定的抗原;抗體;抗體;液體;B淋巴細胞不能分裂,不具備克隆化的能力,培養(yǎng)產(chǎn)生的抗體濃度低,不足以檢測;甲;
2
7
-
2
a
2
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/9/12 1:0:10組卷:1引用:1難度:0.5
相似題
  • 1.2018年1月25日報道,兩只克隆獼猴“中中”和“華華”在中國誕生,突破了現(xiàn)有技術無法克隆靈長類動物的世界難題,將為阿爾茨海默癥、自閉癥等腦疾病帶來前所未有的光明前景,圖1為過程流程圖,請回答下列有關問題:
    菁優(yōu)網(wǎng)
    (1)欲獲得單個雌獼猴體細胞,可用
     
    酶處理動物組織塊。動物細胞培養(yǎng)一般分為
     
    和傳代培養(yǎng)兩個階段過程。在前一階段,貼壁的細胞會出現(xiàn)
     
    現(xiàn)象,所以要進行傳代培養(yǎng)。
    (2)①表示去除細胞核,該過程一般要在卵母細胞培養(yǎng)至
     
    時期再進行,目前使用的去核方法是
     
    。②表示
     
    。
    (3)A細胞的獲得過程屬于
     
    (有性/無性)生殖,在培養(yǎng)早期胚胎時,培養(yǎng)液中通常要添加
     
    等一些天然成分。
    (4)根據(jù)圖2回答相關問題:
    若圖表示動物細胞融合的過程,過程①區(qū)別于植物細胞常用的誘導劑是
     
    。
    若圖表示制備單克隆抗體的部分過程,甲細胞為小鼠的骨髓瘤細胞,則乙細胞為
     
    。
    發(fā)布:2024/9/11 6:0:10組卷:0引用:2難度:0.6
  • 菁優(yōu)網(wǎng)2.抗體的結(jié)構(gòu)如圖所示,它由兩條H鏈和兩條L鏈組成。同一物種C區(qū)氨基酸序列恒定,不同抗體結(jié)合抗原的V區(qū)氨基酸序列有差異。
    (1)在生物體內(nèi),抗體是由
     
    細胞分泌的,與其合成與分泌直接相關的細胞器有
     
    。
    (2)傳統(tǒng)方法獲取抗體時,需要將相應的抗原反復注射到動物體內(nèi),從動物的血清中分離。顯然,這種方法產(chǎn)生的抗體量和純度等都很低特異性差,單克隆抗體的出現(xiàn),克服了傳統(tǒng)抗體的不足,單克隆抗體是指
     
    。
    (3)天然的抗體左右兩個V區(qū)結(jié)構(gòu)完全相同,只能結(jié)合相同的抗原。通過一定技術手段可以得到雙功能抗體(又叫雙特異性抗體),它的兩個V區(qū)能結(jié)合不同的抗原。制備雙功能抗體的基本方法如下:將能分泌抗體1的雜交瘤細胞(A細胞)與能分泌抗體2的淋巴細胞(B細胞)進行融合,形成可分泌兩種親代抗體和雜種抗體的雜種-雜交瘤細胞(A-B)。細胞融合時需要用
     
    、聚乙二醇或電激等誘導,融合后總共應該有
     
    種細胞(最多考慮兩兩融合)。
    (4)雙功能抗體在癌癥治療中可作為“生物導彈”:用其中一個V區(qū)識別癌細胞表面
     
    ,用另一個V區(qū)將T細胞等殺傷細胞定向帶到癌細胞所在的位置,這樣造成腫瘤局部免疫細胞聚焦的效果。
    (5)細胞融合方法得到的雙功能抗體,只是將兩個不同抗體的V區(qū)集中到了一個抗體上,并未改變V區(qū)的結(jié)構(gòu)。通過
     
    技術,可以對雙功能抗體的V區(qū)進行設計改造,使其更適合人類的需要。這種改造,最終還必須通過對DNA分子的改造來完成,因而該技術也稱為
     
    發(fā)布:2024/9/3 2:0:8組卷:8引用:2難度:0.7
  • 3.回答下列(一)、(二)小題:
    (一)下面是某生物興趣小組同學配制的培養(yǎng)基,將馬鈴薯去皮切塊,加水煮沸一定時間,過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂,用水定容后滅菌,得到M培養(yǎng)基?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)在馬鈴薯浸出液中含有微生物生長所需的水、碳源、
     
    、生長因子等,向馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖的原因是
     
    。
    (2)若用M培養(yǎng)基分離酵母菌或霉菌,需要在培養(yǎng)基中加入青霉素,該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基,加入青霉素能分離酵母菌和霉菌的機理是
     
    。
    (3)若用M培養(yǎng)基分離土壤中能分解纖維素的微生物,需要用
     
    替代M培養(yǎng)基中的碳源,同時要加入剛果紅染料,已知剛果紅可以與纖維素形成紅色復合物,但并不和纖維素水解后的生成物發(fā)生這種反應。接種土壤浸出液后,經(jīng)培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以這些細菌為中心的透明圈,產(chǎn)生透明圈的原因是
     
    。
    (4)若用M培養(yǎng)基生產(chǎn)谷氨酸,需要調(diào)整培養(yǎng)基中的碳氮比,研究發(fā)現(xiàn),培養(yǎng)基碳氮比為4:1時,菌體大量繁殖,谷氨酸積累
     
    ;當培養(yǎng)基碳氮比為3:1時,菌體繁殖受到抑制,谷氨酸產(chǎn)量則
     
    。
    (二)單克隆抗體被廣泛用作診斷試劑,在多種疾病的診斷和病原體鑒定中發(fā)揮重要的作用。如圖是單克隆抗體制備示意圖,結(jié)合相關知識回答下列問題:
    菁優(yōu)網(wǎng)
    (5)過程①加的促融劑是
     
    ,只考慮兩兩融合則①有
     
    種融合形式。
    (6)在HAT培養(yǎng)基中能生存的細胞是
     
    ,該培養(yǎng)基為
     
    。
    (7)過程③用96孔板培養(yǎng)和篩選雜交瘤細胞,具體方法是
     
    ,篩選的原理是
     
    ,篩選的結(jié)果是既能產(chǎn)生特異性抗體,又能無限繁殖的雜交瘤細胞。
    (8)單克隆抗體的最大優(yōu)點是
     
    (答出一點即可)。若制備能診斷新冠病毒的單克隆抗體診斷試劑盒,則注射抗原A為
     
    。
    發(fā)布:2024/9/12 4:0:8組卷:4引用:2難度:0.6
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