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菁優(yōu)網(wǎng)基因工程可以賦予生物新的性狀,科研人員利用基因工程技術(shù)以期待獲得具備抗旱特性的小麥。請回答下列問題:
(1)研究發(fā)現(xiàn),某些植物的種子脫水?dāng)?shù)十年后復(fù)水仍能夠恢復(fù)活性,原因是細胞中積累海藻糖。科研人員擬將酵母菌的海藻糖合成酶基因(TPS)轉(zhuǎn)入小麥中。圖標注了載體TPS基因的酶切位點和預(yù)期的基因表達載體的結(jié)構(gòu),表格列舉了限制酶的識別序列。

識別序列
BamHⅠ 5′GGATCC3′
SacⅠ 5′GAGCTC3′
HindⅢ 5′AAGCTT3′
XbaⅠ 5′TCTAGA3′
①科研人員利用PCR技術(shù)獲得大量的TPS基因?,F(xiàn)將②種引物的一側(cè)添加限制酶識別序列,這樣TPS基因的PCR產(chǎn)物和載體用相同的限制酶切割后,可利用
DNA連接
DNA連接
酶將TPS基因拼接到載體的切口處,形成基因表達載體。
②從圖分析,在TPS基因兩側(cè)引入的是
BamHI、SacI
BamHI、SacI
限制酶的酶切位點。設(shè)計的引物序列為
5’-GGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT、5’-GAGCTCAGCCTAACGTACAAGTTCGT
5’-GGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT、5’-GAGCTCAGCCTAACGTACAAGTTCGT
。
(2)圖中Bar基因是抗除草劑基因?;虮磉_載體轉(zhuǎn)入細胞后,在獲得的植株葉片上涂抹除草劑,篩選出7株抗除草劑個體。Bar基因作為載體上的
標記
標記
基因輔助篩選TPS轉(zhuǎn)基因植株。
(3)現(xiàn)對篩選出的抗除草劑個體進行DNA水平的檢測。請?zhí)顚懕砀?,完成實驗設(shè)計:
組別 植株編號1-7 對照組1 對照組2
模板
(提取的)1-7號植株DNA
(提取的)1-7號植株DNA
基因表達載體或TPS基因片段
空質(zhì)粒載體
空質(zhì)粒載體
PCR體系中其他物質(zhì) 擴增緩沖液、水、引物、③
4種脫氧核苷酸(或dNTP)
4種脫氧核苷酸(或dNTP)
、④
Taq酶
Taq酶
電泳預(yù)期結(jié)果
有條帶
有條帶
有條帶 沒有條帶
(4)圖為用探針檢驗?zāi)骋晦D(zhuǎn)海藻糖合成酶基因抗旱植物基因型的原理,相關(guān)基因用R和r表示。若被檢植株發(fā)生A現(xiàn)象,不發(fā)生B、C現(xiàn)象;則被檢植物的基因型為
RR
RR
。
菁優(yōu)網(wǎng)

【答案】DNA連接;BamHI、SacI;5’-GGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT、5’-GAGCTCAGCCTAACGTACAAGTTCGT;標記;(提取的)1-7號植株DNA;空質(zhì)粒載體;4種脫氧核苷酸(或dNTP);Taq酶;有條帶;RR
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/8/9 8:0:9組卷:74引用:8難度:0.6
相似題
  • 1.基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速,如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/11/14 7:0:1組卷:62引用:7難度:0.7
  • 2.經(jīng)由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應(yīng),嚴重時甚至危及生命,因此必須對食品中生物胺的含量進行減控。微生物來源的多銅氧化酶(MCO)能高效分解生物胺,基于基因工程規(guī)模化生產(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因,然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實現(xiàn)了高效表達。
    (1)通過上述基因工程技術(shù)獲取目標產(chǎn)物,涉及如下步驟,則合理的操作步驟排序是
     
    (填寫下列編號)。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)?;a(chǎn)目標蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細胞
    ⑤目的基因和運載體重組構(gòu)建表達載體
    (2)在PCR過程中,引物的功能是
     

    A.啟動DNA復(fù)制
    B.規(guī)定擴增區(qū)間
    C.解旋DNA雙鏈
    D.充當(dāng)復(fù)制模板
    菁優(yōu)網(wǎng)
    (3)為獲得目的基因MCO(圖甲灰色表示的序列),正確設(shè)計的PCR引物應(yīng)為圖甲中的
     

    (4)獲取目的基因后,需要和載體重組導(dǎo)入受體細胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是
     
    (填DNA或RNA/DNA或RNA)。
    (5)在常規(guī)PCR的每一輪擴增反應(yīng)中,溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    (6)若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端,那么載體質(zhì)粒pCLY15(圖丙中圖1)需用
     
     
    切開,才能與MCO片段高效連接。
    (7)下列實驗操作中,能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,用合適的限制酶切割
    B.在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑,以克隆的顏色進行鑒別
    C.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,以此為模板進行PCR檢測
    D.將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc(四環(huán)素)的平板上,根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布:2024/11/14 4:30:2組卷:29引用:3難度:0.5
  • 3.用限制酶EcoRⅤ單獨切割某普通質(zhì)粒,可產(chǎn)生14kb(1kb即1000個堿基對)的長鏈,而同時用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒,可得到三種長度的DNA片段,見圖(其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個黏性末端)。
    菁優(yōu)網(wǎng)
    若用MboⅠ限制酶單獨切割該普通質(zhì)粒,則產(chǎn)生的DNA片段的長度為(  )

    發(fā)布:2024/11/14 4:0:2組卷:89引用:9難度:0.7
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