圖1表示含有目的基因D的DNA片段長度(bp即堿基對)和部分堿基序列,圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列.現(xiàn)有MspI、BamHI、MboI、SmaI 4種限制性核酸內(nèi)切它們識別的堿基序列和酶切位點分別為C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG.
(1)若用限制酶SmaI完全切割圖1中DNA片段,其產(chǎn)物長度分別為537、790、661537、790、661.
若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對被T-A堿基對替換,那么基因D就突變?yōu)榛騞.從隱性純合子中分離出圖1及其對應(yīng)的DNA片段,用限制酶Sma I完全切割,產(chǎn)物中共有44種不同長度的DNA片段.
(2)為了提高試驗成功率,需要通過PCRPCR技術(shù)擴增目的基因,以獲得目的基因的大量拷貝.該方法也是檢測遺傳遺傳多樣性的最簡單方法.
(3)若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進行連接,形成重組質(zhì)粒,那么應(yīng)選用的限制酶是BamHⅠBamHⅠ.
(4)在選出的大腸桿菌內(nèi)基因D能成功表達的原因是生物共用一套遺傳密碼子生物共用一套遺傳密碼子.其表達產(chǎn)物是一條多肽鏈,如考慮終止密碼,則其至少含有的氧原子數(shù)為341341.
(5)為了篩選出成功導入含目的基因D的重組質(zhì)粒的大腸桿菌,首先將大腸桿菌在含抗生素B抗生素B的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖3的菌落. 再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上,使絨布面沾上菌落,然后將絨布按到含另一種抗生素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖4的結(jié)果(空圈表示與圖3對照無菌落的位置).請在圖3中圈出一個含目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌的菌落.
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【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】537、790、661;4;PCR;遺傳;BamHⅠ;生物共用一套遺傳密碼子;341;抗生素B;
【解答】
【點評】
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