內(nèi)皮素（ET）是一種多肽，主要通過與靶細(xì)胞膜上的ET受體（ETA）結(jié)合而發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)．科研人員通過構(gòu)建表達(dá)載體，實(shí)現(xiàn)ETA基因在大腸桿菌細(xì)胞中的高效表達(dá)，其過程如下圖所示，圖中SNAP基因是一種熒光蛋白基因，限制酶ApaⅠ的識別序列為
，限制酶XhoⅠ的識別序列為
．請據(jù)圖分析回答：
（1）進(jìn)行過程①時，需要加入緩沖液、引物、dNTP和 反轉(zhuǎn)錄（逆轉(zhuǎn)錄）反轉(zhuǎn)錄（逆轉(zhuǎn)錄）酶等．完成過程①②③的目的是 獲取目的基因（ETA基因）獲取目的基因（ETA基因）．
（2）過程③和⑤中，限制酶XhoⅠ切割DNA，使 磷酸二酯磷酸二酯鍵斷開，形成的黏性末端是 
．
（3）構(gòu)建的重組表達(dá)載體，目的基因上游的啟動子是 RNA聚合酶識別和結(jié)合RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，進(jìn)而可驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄．除圖中已標(biāo)出的結(jié)構(gòu)外，基因表達(dá)載體還應(yīng)具有的結(jié)構(gòu)是 終止子終止子．
（4）過程⑥要用CaCl2預(yù)先處理大腸桿菌，使其成為容易吸收外界DNA的 感受態(tài)感受態(tài)細(xì)胞．
（5）將SNAP基因與ETA基因結(jié)合構(gòu)成融合基因，其目的是有利于檢測 ETA基因能否表達(dá)及表達(dá)量ETA基因能否表達(dá)及表達(dá)量．
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】反轉(zhuǎn)錄（逆轉(zhuǎn)錄）；獲取目的基因（ETA基因）；磷酸二酯；；RNA聚合酶識別和結(jié)合；終止子；感受態(tài)；ETA基因能否表達(dá)及表達(dá)量
；RNA聚合酶識別和結(jié)合；終止子；感受態(tài)；ETA基因能否表達(dá)及表達(dá)量【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：304引用：8難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
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發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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