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內(nèi)皮素（ET）是一種多肽，主要通過與靶細(xì)胞膜上的ET受體（ETA）結(jié)合而發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)．科研人員通過構(gòu)建表達(dá)載體，實現(xiàn)ETA基因在大腸桿菌細(xì)胞中的高效表達(dá)，其過程如下圖所示，圖中SNAP基因是一種熒光蛋白基因，限制酶ApaⅠ的識別序列為菁優(yōu)網(wǎng)，限制酶XhoⅠ的識別序列為菁優(yōu)網(wǎng)．請據(jù)圖分析回答：
菁優(yōu)網(wǎng)
（1）進行過程①時，需要加入緩沖液、引物、dNTP和
反轉(zhuǎn)錄（逆轉(zhuǎn)錄）
反轉(zhuǎn)錄（逆轉(zhuǎn)錄）
酶等．完成過程①②③的目的是
獲取目的基因（ETA基因）
獲取目的基因（ETA基因）
．
（2）過程③和⑤中，限制酶XhoⅠ切割DNA，使
磷酸二酯
磷酸二酯
鍵斷開，形成的黏性末端是
菁優(yōu)網(wǎng)
菁優(yōu)網(wǎng)
．
（3）構(gòu)建的重組表達(dá)載體，目的基因上游的啟動子是
RNA聚合酶識別和結(jié)合
RNA聚合酶識別和結(jié)合
的部位，進而可驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄．除圖中已標(biāo)出的結(jié)構(gòu)外，基因表達(dá)載體還應(yīng)具有的結(jié)構(gòu)是
終止子
終止子
．
（4）過程⑥要用CaCl2預(yù)先處理大腸桿菌，使其成為容易吸收外界DNA的
感受態(tài)
感受態(tài)
細(xì)胞．
（5）將SNAP基因與ETA基因結(jié)合構(gòu)成融合基因，其目的是有利于檢測
ETA基因能否表達(dá)及表達(dá)量
ETA基因能否表達(dá)及表達(dá)量
．

【答案】反轉(zhuǎn)錄（逆轉(zhuǎn)錄）；獲取目的基因（ETA基因）；磷酸二酯；菁優(yōu)網(wǎng)；RNA聚合酶識別和結(jié)合；終止子；感受態(tài)；ETA基因能否表達(dá)及表達(dá)量
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：304引用：8難度：0.5
相似題

  • 菁優(yōu)網(wǎng)1．限制酶a、限制酶b能將某線性DNA分子片段切割，其識別序列和切割位點如圖所示。下列敘述錯誤的是（　?。?/h2>

    發(fā)布：2024/11/10 15:30:3組卷：21引用：5難度：0.7

  • 2．中國甜柿的自然脫澀與乙醛代謝關(guān)鍵酶基因（PDC）密切相關(guān)，推測澀味程度可能與PDC基因的表達(dá)情況有關(guān)。
    （1）啟動子位于基因首端，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點，同時啟動子區(qū)域還存在著許多調(diào)控蛋白的結(jié)合位點，RNA聚合酶和調(diào)控蛋白共同影響了基因的
     
    。
    （2）為篩選PDC基因的調(diào)控蛋白，科研人員進行了下列實驗。
    ①PDC基因的啟動子序列未知，為獲得大量該基因啟動子所在片段，可利用限制酶將基因組DNA進行酶切，然后在
     
    的作用下將已知序列信息的接頭片段連接在PDC基因的上游，根據(jù)
     
    和PDC基因編碼序列設(shè)計引物進行PCR.利用質(zhì)粒A（圖1）構(gòu)建含有PDC基因啟動子片段的重組質(zhì)粒并導(dǎo)入代謝缺陷型酵母菌，用不含
     
    的培養(yǎng)基可篩選出成功轉(zhuǎn)化的酵母菌Y1H。
    菁優(yōu)網(wǎng)
    ②質(zhì)粒G（圖2）上的AD基因表達(dá)出的AD蛋白與啟動子足夠靠近時，能夠激活后續(xù)基因轉(zhuǎn)錄，因此需獲得待測蛋白與AD蛋白的融合蛋白用于后續(xù)篩選?？蒲腥藛T從中國甜柿中提取RNA，將逆轉(zhuǎn)錄形成的各種cDNA與質(zhì)粒G連接后導(dǎo)入酵母菌，此時應(yīng)選擇質(zhì)粒G中的位點
     
    （填序號1～5）作為cDNA的插入位點，最終獲得攜帶不同cDNA片段的酵母菌群Y187。
    ③重組酵母Y187與Y1H能夠進行接合生殖，形成的接合子含有兩種酵母菌質(zhì)粒上的所有基因。若接合子能在含有金擔(dān)子素的培養(yǎng)基中生存，則推測待測蛋白是PDC基因的調(diào)控蛋白，請結(jié)合圖示闡述作出該推測的理由。

    發(fā)布：2024/11/11 0:0:2組卷：82引用：2難度：0.7

  • 3．某一質(zhì)粒載體如圖甲所示，Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Tett表示四環(huán)素抗性基因。有人將此質(zhì)粒載體用BamHⅠ酶切后，與用BamHⅠ酶切獲得的目的基因混合，加入DNA連接酶進行連接反應(yīng)，用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化后得到多種大腸桿菌，并利用培養(yǎng)基乙和丙篩選出導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌。下列敘述錯誤的是（　?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布：2024/11/10 9:0:1組卷：59引用：4難度：0.6
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