小鼠淋巴細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)液中活細(xì)胞和死亡細(xì)胞密度統(tǒng)計(jì)結(jié)果如圖1,圖2表示抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過程?;卮鹣铝袉栴}:
(1)圖1中培養(yǎng)B淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)基中需添加一定量的
抗生素
抗生素
,以防止培養(yǎng)過程中被雜菌污染。曲線bc段產(chǎn)生的主要原因是 培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不足及有害代謝產(chǎn)物的積累等
培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不足及有害代謝產(chǎn)物的積累等
。
(2)圖2制備單克隆抗體前,需對(duì)小鼠注射 胃癌相關(guān)抗原
胃癌相關(guān)抗原
,以獲得產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞。對(duì)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí),在培養(yǎng)基中添加血清的目的是 提供細(xì)胞所需的未知營(yíng)養(yǎng)成分
提供細(xì)胞所需的未知營(yíng)養(yǎng)成分
。
(3)用化學(xué)試劑 PEG(聚乙二醇)
PEG(聚乙二醇)
誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合;乙到丙過程在選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng),培養(yǎng)后篩選出 融合的雜交瘤
融合的雜交瘤
細(xì)胞。
(4)丙到丁過程,應(yīng)選擇抗體檢測(cè)呈 陽性
陽性
的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng),最后從 細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水
細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水
中獲取大量的抗胃癌單克隆抗體。