乳鐵蛋白屬于轉(zhuǎn)鐵蛋白，是乳汁中主要的鐵結(jié)合蛋白，具有免疫以及參與調(diào)節(jié)鐵代謝和細(xì)胞生長等功能。由于人乳的來源有限，不可能通過直接提取的方法來大量獲得人乳鐵蛋白，所以科研人員將人乳鐵蛋白基因進(jìn)行異源表達(dá)（在其他生物體的組織細(xì)胞中表達(dá)）。回答下列問題：
（1）科研人員首先從人體的

乳腺

乳腺

組織細(xì)胞中獲取乳鐵蛋白的mRNA，并通過

逆轉(zhuǎn)錄

逆轉(zhuǎn)錄

獲得乳鐵蛋白的cDNA，該cDNA不含內(nèi)含子的原因是

成熟的mRNA中不含內(nèi)含子的轉(zhuǎn)錄區(qū)段（mRNA在加工過程中切除了內(nèi)含子的轉(zhuǎn)錄區(qū)段）

成熟的mRNA中不含內(nèi)含子的轉(zhuǎn)錄區(qū)段（mRNA在加工過程中切除了內(nèi)含子的轉(zhuǎn)錄區(qū)段）

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（2）將獲得的人乳鐵蛋白的cDNA采用PCR技術(shù)進(jìn)行大量擴(kuò)增。PCR擴(kuò)增乳鐵蛋白基因的前提是

已知一段乳鐵蛋白基因的核苷酸序列

已知一段乳鐵蛋白基因的核苷酸序列

，PCR每次循環(huán)可分為

變性、復(fù)性和延伸

變性、復(fù)性和延伸

三步。PCR反應(yīng)所需的酶是

熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）

熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）

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（3）在人乳鐵蛋白基因與質(zhì)粒構(gòu)建成的基因表達(dá)載體中，為了控制人乳鐵蛋白基因轉(zhuǎn)錄，在該基因的前后端應(yīng)分別構(gòu)建

啟動子、終止子

啟動子、終止子

等元件。通過顯微注射法將基因表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠的睪丸中，將該小鼠與正常母鼠交配獲得陽性（含目的基因）子代，陽性子代中只有一半能產(chǎn)生人乳鐵蛋白，原因可能是

陽性子代中只有雌性個體能產(chǎn)生人乳鐵蛋白

陽性子代中只有雌性個體能產(chǎn)生人乳鐵蛋白

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