ACC氧化酶是合成乙烯的關(guān)鍵酶，由ACC氧化酶基因控制合成?？蒲腥藛T將人工合成的ACC氧化酶基因反向插入到質(zhì)粒的啟動(dòng)部位之后，構(gòu)成反義ACC氧化酶基因，再通過(guò)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)入番茄染色體DNA中。反義ACC氧化酶基因在番茄細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物能與ACC氧化酶基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物互補(bǔ)配對(duì)，抑制乙烯的產(chǎn)生，使番茄減緩成熟。請(qǐng)回答：
（1）科研人員能直接用化學(xué)合成ACC氧化酶基因的前提條件是

已知ACC氧化酶基因的堿基序列

已知ACC氧化酶基因的堿基序列

。人工合成ACC氧化酶基因后，需用

PCR

PCR

進(jìn)行擴(kuò)增。
（2）在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，為確保ACC氧化酶基因反向插入質(zhì)粒中，需用

2

2

種限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和Ti-質(zhì)粒。為了便于轉(zhuǎn)化后的篩選，表達(dá)載體還應(yīng)具有

抗性基因（或標(biāo)記基因）

抗性基因（或標(biāo)記基因）

。
（3）將含有重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌液涂抹在無(wú)菌番茄幼苗的芽尖，適宜時(shí)間后，用

無(wú)菌水

無(wú)菌水

沖洗芽尖除菌，接種于

固體

固體

（填“固體”或“液體”）培養(yǎng)基，經(jīng)脫分化形成愈傷組織，進(jìn)而形成轉(zhuǎn)基因植株。實(shí)驗(yàn)中選擇番茄幼苗的芽尖作為外植體的原因是

芽尖具有分生組織，全能性表達(dá)能力強(qiáng)

芽尖具有分生組織，全能性表達(dá)能力強(qiáng)

。
（4）反義ACC氧化酶基因抑制轉(zhuǎn)基因番茄乙烯的產(chǎn)生，從基因表達(dá)的過(guò)程來(lái)看，是通過(guò)對(duì)

翻譯

翻譯

過(guò)程的調(diào)控來(lái)實(shí)現(xiàn)的。