根據(jù)基因工程的有關(guān)知識,回答下列問題:
(1)限制性內(nèi)切核酸酶切割DNA分子后產(chǎn)生的片段,其末端類型有
黏性末端
黏性末端
和
平末端
平末端
。
(2)質(zhì)粒載體用EcoRⅠ切割后產(chǎn)生的片段如下:
為使載體與目的基因相連,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,還可用另一種限制性內(nèi)切核酸酶切割,該酶必須具有的特點是
切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產(chǎn)生的末端相同
切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產(chǎn)生的末端相同
。
(3)按其來源不同,基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類,其中從T
4噬菌體分離出來的稱為
T4DNA連接酶
T4DNA連接酶
。
(4)人工合成目的基因后,若要在體外獲得大量目的基因,常采用
PCR
PCR
技術(shù)。該過程所需的DNA聚合酶具有
耐高溫
耐高溫
的特點。
(5)基因工程操作程序的四個步驟中,核心步驟是
基因表達(dá)載體的構(gòu)建
基因表達(dá)載體的構(gòu)建
。而它的下一步是
將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
。
(6)目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞后,還需要進(jìn)行檢測和鑒定,通常我們用
抗原—抗體雜交
抗原—抗體雜交
檢測目的基因是否翻譯出相關(guān)蛋白質(zhì)。