當(dāng)前位置： 2021-2022學(xué)年江蘇省南通市通州區(qū)金沙中學(xué)高二（下）期中生物試卷> 試題詳情

CRISPR-Cpf1敲除系統(tǒng)是Cpf1-crRNA復(fù)合體，利用crRNA引導(dǎo)Cpf1結(jié)合到靶DNA的特定序列上并切割雙鏈DNA分子。利用此系統(tǒng)在基因特定部位切割，再通過(guò)同源重組作用去除靶基因，進(jìn)一步利用質(zhì)粒自身的溫敏特性將質(zhì)粒消除，從而完成基因敲除。為研究精氨酸代謝調(diào)控因子基因（argR基因）對(duì)精氨酸代謝的影響，科研人員利用上述技術(shù)敲除谷氨酸棒狀桿菌argR基因，過(guò)程如圖1。其中kanr是卡那霉素抗性基因，argR-HR1和argR-HR2是argR基因兩側(cè)的部分序列。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）①過(guò)程通過(guò)PCR獲得argR-HR1和argR-HR2，該過(guò)程的原料是
4種游離的脫氧核苷酸（dNTP）
4種游離的脫氧核苷酸（dNTP）
，所需的酶是
Taq酶
Taq酶
。
（2）②過(guò)程需要的酶是
限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶
限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶
，③過(guò)程應(yīng)用
Ca²⁺（或CaCl₂）
Ca²⁺（或CaCl₂）
處理谷氨酸棒狀桿菌使其能吸收質(zhì)粒2。
（3）④過(guò)程經(jīng)過(guò)
轉(zhuǎn)錄、翻譯
轉(zhuǎn)錄、翻譯
表達(dá)出了Cpf1，與DNA復(fù)制相比，⑤過(guò)程特有的堿基互補(bǔ)配對(duì)方式是
A-U
A-U
。
（4）⑥過(guò)程中Cpf1-crRNA復(fù)合體的作用有
識(shí)別DNA分子上特定的堿基序列，并進(jìn)行切割
識(shí)別DNA分子上特定的堿基序列，并進(jìn)行切割
。⑦過(guò)程在同源重組酶的作用下，谷氨酸棒狀桿菌基因組中的
argR
argR
基因被敲除。
（5）由于質(zhì)粒2的溫敏特性，⑧過(guò)程在37℃條件下培養(yǎng)的目的是
消除質(zhì)粒
消除質(zhì)粒
。
（6）為了驗(yàn)證過(guò)程⑧后重組菌種的抗性，通過(guò)影印接種（A、B兩個(gè)培養(yǎng)基中接種菌種的位置相同）培養(yǎng)，結(jié)果如圖2，其中
能在A培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，不能在B培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌株
能在A培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，不能在B培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌株
是完成目的基因被敲除的菌株。

【答案】4種游離的脫氧核苷酸（dNTP）；Taq酶；限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶；Ca²⁺（或CaCl₂）；轉(zhuǎn)錄、翻譯；A-U；識(shí)別DNA分子上特定的堿基序列，并進(jìn)行切割；argR；消除質(zhì)粒；能在A培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，不能在B培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌株

【解答】

【點(diǎn)評(píng)】

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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：5引用：2難度：0.7

相似題

1．某科研小組從土壤菌株A、B中分離到同源性為93%的Bt1抗蟲基因和Bt2抗蟲基因的編碼序列，并運(yùn)用交錯(cuò)延伸PCR技術(shù)獲得了抗蟲性能強(qiáng)的重組B基因，轉(zhuǎn)入煙草獲得成功，過(guò)程如圖所示。下列選項(xiàng)正確的是（　?。?br />
注：①交錯(cuò)延伸PCR：基因Bt1和Bt2均作為模板，所需引物相同，圖中僅示其中一條鏈的延伸情況。②啟動(dòng)子Pr1a可在煙草葉肉細(xì)胞中特異性啟動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄。③圖中生長(zhǎng)素合成酶基因是通過(guò)成熟mRNA逆轉(zhuǎn)錄獲得的DNA片段，可使植物細(xì)胞合成生長(zhǎng)素。

A．若用EcoRⅠ（5'-G↓AATTC-3'）和限制酶XmaⅠ（5'-G↓CCGGG-3'）雙酶切多個(gè)目的基因，能避免兩個(gè)目的基因連接成環(huán)

B．復(fù)制原點(diǎn)是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)

C．在培養(yǎng)愈傷組織的培養(yǎng)基中添加卡那霉素可以篩選含有Bt重組基因的細(xì)胞

D．圖中生長(zhǎng)素合成酶基因不能促進(jìn)愈傷組織生根

發(fā)布：2024/11/16 21:0:1組卷：36引用：2難度：0.5

解析

2．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（　?。?br />

A．若某基因是從人的細(xì)胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的，則該基因中不含啟動(dòng)子序列

B．?dāng)U增目的基因時(shí)，利用耐高溫的DNA連接酶從引物a、b的3′-端進(jìn)行子鏈合成

C．導(dǎo)入人血清白蛋白基因的綿羊受體細(xì)胞是乳腺細(xì)胞

D．利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法可將含有目的基因的重組質(zhì)粒整合到植物受體細(xì)胞的染色體DNA上

發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

解析

3．經(jīng)由食物攝取過(guò)量生物胺會(huì)引起頭痛、胃腸道不適和過(guò)敏等不良反應(yīng)，嚴(yán)重時(shí)甚至危及生命，因此必須對(duì)食品中生物胺的含量進(jìn)行減控。微生物來(lái)源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)?；a(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國(guó)科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實(shí)現(xiàn)了高效表達(dá)。
（1）通過(guò)上述基因工程技術(shù)獲取目標(biāo)產(chǎn)物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是

（填寫下列編號(hào)）。
①篩選和鑒定含目的基因的受體細(xì)胞
②選用合適的方法獲取目的基因
③借助發(fā)酵工程規(guī)?；a(chǎn)目標(biāo)蛋白
④目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
⑤目的基因和運(yùn)載體重組構(gòu)建表達(dá)載體
（2）在PCR過(guò)程中，引物的功能是

。
A．啟動(dòng)DNA復(fù)制
B．規(guī)定擴(kuò)增區(qū)間
C．解旋DNA雙鏈
D．充當(dāng)復(fù)制模板

（3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設(shè)計(jì)的PCR引物應(yīng)為圖甲中的

。
（4）獲取目的基因后，需要和載體重組導(dǎo)入受體細(xì)胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是

（填DNA或RNA/DNA或RNA）。
（5）在常規(guī)PCR的每一輪擴(kuò)增反應(yīng)中，溫度隨時(shí)間的變化順序是圖乙中的

。
（6）若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開(kāi)后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質(zhì)粒pCLY15（圖丙中圖1）需用

和

切開(kāi)，才能與MCO片段高效連接。
（7）下列實(shí)驗(yàn)操作中，能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是

。
A．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，用合適的限制酶切割
B．在選擇培養(yǎng)基中添加X(jué)-gal試劑，以克隆的顏色進(jìn)行鑒別
C．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，以此為模板進(jìn)行PCR檢測(cè)
D．將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據(jù)大腸桿菌生長(zhǎng)與否加以鑒別
發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5
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2．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ?。?br />

2．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（　?。?br />