PCR技術(shù)是20世紀(jì)80年代發(fā)展起來的新技術(shù),廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、基因工程及其他與DNA鑒定相關(guān)的領(lǐng)域,如疾病檢測、商品檢疫、法醫(yī)鑒定等。回答下列問題;
(1)引物是PCR技術(shù)中的關(guān)鍵物質(zhì)。利用PCR技術(shù)擴增某個致病基因時,所設(shè)計的一對引的特點。引物必須具備兩種引物分別與致病基因的兩條單鏈配對兩種引物分別與致病基因的兩條單鏈配對和兩種引物間不能互補配對兩種引物間不能互補配對的特點。
(2)將PCR所需的物質(zhì)準(zhǔn)備完畢后,在PCR儀上用94~96℃的溫度預(yù)熱5min,其目的是利用高溫使DNA變性形成單鏈片段利用高溫使DNA變性形成單鏈片段。溫度降低到50~60℃后,發(fā)生引物與模板鏈的結(jié)合引物與模板鏈的結(jié)合,將溫度回升至72℃,反應(yīng)體系中的熱穩(wěn)定DNA聚合熱穩(wěn)定DNA聚合酶催化dNTPdNTP合成雙鏈DNA。
(3)多重PCR技術(shù)在一個反應(yīng)體系中使用兩對以上的引物,可應(yīng)用于檢測食品中的多種致病菌,原因是待測樣品存在多種致病菌,每對引物用于擴增某種致病菌的特異性基因,多對引物可同時擴增出多種目的基因待測樣品存在多種致病菌,每對引物用于擴增某種致病菌的特異性基因,多對引物可同時擴增出多種目的基因。
【考點】目的基因的篩選與獲取.
【答案】兩種引物分別與致病基因的兩條單鏈配對;兩種引物間不能互補配對;利用高溫使DNA變性形成單鏈片段;引物與模板鏈的結(jié)合;熱穩(wěn)定DNA聚合;dNTP;待測樣品存在多種致病菌,每對引物用于擴增某種致病菌的特異性基因,多對引物可同時擴增出多種目的基因
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:35引用:2難度:0.7
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1.通過設(shè)計引物,運用PCR技術(shù)可以實現(xiàn)目的基因的定點誘變。如圖為基因工程中獲取突變基因的過程,其中引物1序列中含有一個堿基T不能與目的基因片段配對,但不影響引物與模板鏈的整體配對,反應(yīng)體系中引物1和引物2的5′端分別設(shè)計增加限制酶a和限制酶b的識別位點。有關(guān)敘述正確的是( )
發(fā)布:2024/11/19 10:30:1組卷:118引用:5難度:0.7 -
2.雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)與脫氧核苷三磷酸(dNTP)的結(jié)構(gòu)如圖所示。已知ddNTP按堿基互補配對的方式加到正在復(fù)制的DNA子鏈中后,子鏈的延伸立即終止。現(xiàn)通過PCR技術(shù)獲得被標(biāo)記且以堿基“T”為末端的、不同長度的DNA子鏈片段。在反應(yīng)管中已經(jīng)有單鏈模板、引物、相關(guān)的酶和相應(yīng)的緩沖液等,還需加入的原料是( ?。?br />
①dCTP,dGTP,dATP
②dGTP,dATP,dTTP,dCTP
③α位被32P標(biāo)記的ddTTP
④γ位被32P標(biāo)記的ddTTP發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:28引用:1難度:0.6 -
3.目前研究混雜DNA群體中的特異DNA序列,一般基于兩種不同的方法,即DNA克隆和DNA分子雜交,如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是( ?。?/h2>
發(fā)布:2024/11/22 4:0:1組卷:24引用:2難度:0.6
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