利用基因工程生產(chǎn)人胰島素有兩種方法。
方法一:將胰島素基因轉(zhuǎn)入細菌細胞。進行微生物培養(yǎng),提取胰島素。
方法二:將胰島素基因轉(zhuǎn)入哺乳動物的受精卵,培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因動物并從其乳汁中提取胰島素。
(1)使用方法一時,在細菌細胞中合成的胰島素原需在
蛋白酶
蛋白酶
(填“蛋白酶”、“DNA酶”或“脂肪酶”)的作用下才能變成具有活性的胰島素;為使胰島素基因能順利進入細菌細胞,應(yīng)用 Ca2+
Ca2+
處理細菌細胞。
(2)方法二將目的基因?qū)胧荏w細胞常用的方法是 顯微注射法
顯微注射法
,要保人胰島素基因只在哺乳動物的乳腺細胞中表達,應(yīng)該采取的措施是在人胰島素基因的首端加上 乳腺中特異表達的基因的啟動子等調(diào)控元件
乳腺中特異表達的基因的啟動子等調(diào)控元件
。轉(zhuǎn)基因動物進入泌乳期后,可以通過分泌的乳汁來生產(chǎn)所需的藥品,因此稱為 乳腺生物反應(yīng)器
乳腺生物反應(yīng)器
。
(3)利用PCR技術(shù)擴增胰島素基因的前提是已知胰島素基因兩端的核苷酸序列,以便根據(jù)這一序列 合成引物
合成引物
,每次循環(huán)可以分為 變性、復性和延伸
變性、復性和延伸
三步。
(4)培育轉(zhuǎn)基因生物的核心工作是構(gòu)建基因表達載體,構(gòu)建基因表達載體的目的是 使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,并且遺傳給下一代;使目的基因能夠在受體細胞中表達和發(fā)揮作用
使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,并且遺傳給下一代;使目的基因能夠在受體細胞中表達和發(fā)揮作用
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