研究發(fā)現(xiàn)作物M的品系甲有抗蟲(chóng)等多種優(yōu)良性狀,但甜度不高。為了改良品系甲,增加其甜度,育種工作者做了如下實(shí)驗(yàn):從品系乙中提取與甜度有關(guān)的s基因,通過(guò)基因重組技術(shù),以Ti質(zhì)粒為載體,以品系甲的葉片為受體細(xì)胞,培育出轉(zhuǎn)s基因的新品系。
回答下列問(wèn)題:
(1)利用PCR技術(shù)從品系乙的基因組中獲取S基因時(shí),需要在一定的緩沖液中才能進(jìn)行,需提供引物、原料外,還需提供的物質(zhì)有
耐高溫的DNA聚合酶、DNA模板
耐高溫的DNA聚合酶、DNA模板
用于獲取S基因的引物需滿(mǎn)足的條件是 能與S基因母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對(duì)、短單鏈核酸
能與S基因母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對(duì)、短單鏈核酸
利用PCR獲取目的基因過(guò)程中,4種脫氧核苷酸加 3'
3'
(填“3′”或“5′”)端。
(2)如圖是S基因和載體的限制性?xún)?nèi)切核酸酶切點(diǎn)。為了成功構(gòu)建基因表達(dá)載體,確保目的基因插入載體中方向正確,最好選用 XbaⅠ、HindⅢ
XbaⅠ、HindⅢ
酶切割S基因和載體;由圖可知,構(gòu)建表達(dá)載體時(shí),S基因是插入在T-DNA上,T-DNA的作用是 T-DNA可轉(zhuǎn)移到被侵染的細(xì)胞,并將其整合到該細(xì)胞的染色體DNA上
T-DNA可轉(zhuǎn)移到被侵染的細(xì)胞,并將其整合到該細(xì)胞的染色體DNA上
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(3)若要通過(guò)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)S基因在轉(zhuǎn)基因植物中表達(dá)出目的蛋白,請(qǐng)簡(jiǎn)要寫(xiě)實(shí)驗(yàn)思路 從品系甲相應(yīng)細(xì)胞中提取S蛋白,使用相應(yīng)抗體進(jìn)行抗原-抗體雜交,檢測(cè)是否出現(xiàn)雜交帶
從品系甲相應(yīng)細(xì)胞中提取S蛋白,使用相應(yīng)抗體進(jìn)行抗原-抗體雜交,檢測(cè)是否出現(xiàn)雜交帶
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