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研究發(fā)現(xiàn)作物M的品系甲有抗蟲(chóng)等多種優(yōu)良性狀,但甜度不高。為了改良品系甲,增加其甜度,育種工作者做了如下實(shí)驗(yàn):從品系乙中提取與甜度有關(guān)的s基因,通過(guò)基因重組技術(shù),以Ti質(zhì)粒為載體,以品系甲的葉片為受體細(xì)胞,培育出轉(zhuǎn)s基因的新品系。
回答下列問(wèn)題:
(1)利用PCR技術(shù)從品系乙的基因組中獲取S基因時(shí),需要在一定的緩沖液中才能進(jìn)行,需提供引物、原料外,還需提供的物質(zhì)有
耐高溫的DNA聚合酶、DNA模板
耐高溫的DNA聚合酶、DNA模板
用于獲取S基因的引物需滿(mǎn)足的條件是
能與S基因母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對(duì)、短單鏈核酸
能與S基因母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對(duì)、短單鏈核酸
利用PCR獲取目的基因過(guò)程中,4種脫氧核苷酸加
3'
3'
(填“3′”或“5′”)端。
(2)如圖是S基因和載體的限制性?xún)?nèi)切核酸酶切點(diǎn)。為了成功構(gòu)建基因表達(dá)載體,確保目的基因插入載體中方向正確,最好選用
XbaⅠ、HindⅢ
XbaⅠ、HindⅢ
酶切割S基因和載體;由圖可知,構(gòu)建表達(dá)載體時(shí),S基因是插入在T-DNA上,T-DNA的作用是
T-DNA可轉(zhuǎn)移到被侵染的細(xì)胞,并將其整合到該細(xì)胞的染色體DNA上
T-DNA可轉(zhuǎn)移到被侵染的細(xì)胞,并將其整合到該細(xì)胞的染色體DNA上
。
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(3)若要通過(guò)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)S基因在轉(zhuǎn)基因植物中表達(dá)出目的蛋白,請(qǐng)簡(jiǎn)要寫(xiě)實(shí)驗(yàn)思路
從品系甲相應(yīng)細(xì)胞中提取S蛋白,使用相應(yīng)抗體進(jìn)行抗原-抗體雜交,檢測(cè)是否出現(xiàn)雜交帶
從品系甲相應(yīng)細(xì)胞中提取S蛋白,使用相應(yīng)抗體進(jìn)行抗原-抗體雜交,檢測(cè)是否出現(xiàn)雜交帶
。

【答案】耐高溫的DNA聚合酶、DNA模板;能與S基因母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對(duì)、短單鏈核酸;3';XbaⅠ、HindⅢ;T-DNA可轉(zhuǎn)移到被侵染的細(xì)胞,并將其整合到該細(xì)胞的染色體DNA上;從品系甲相應(yīng)細(xì)胞中提取S蛋白,使用相應(yīng)抗體進(jìn)行抗原-抗體雜交,檢測(cè)是否出現(xiàn)雜交帶
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書(shū)面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/8/21 7:0:1組卷:5引用:1難度:0.5
相似題
  • 1.中國(guó)甜柿的自然脫澀與乙醛代謝關(guān)鍵酶基因(PDC)密切相關(guān),推測(cè)澀味程度可能與PDC基因的表達(dá)情況有關(guān)。
    (1)啟動(dòng)子位于基因首端,是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn),同時(shí)啟動(dòng)子區(qū)域還存在著許多調(diào)控蛋白的結(jié)合位點(diǎn),RNA聚合酶和調(diào)控蛋白共同影響了基因的
     
    。
    (2)為篩選PDC基因的調(diào)控蛋白,科研人員進(jìn)行了下列實(shí)驗(yàn)。
    ①PDC基因的啟動(dòng)子序列未知,為獲得大量該基因啟動(dòng)子所在片段,可利用限制酶將基因組DNA進(jìn)行酶切,然后在
     
    的作用下將已知序列信息的接頭片段連接在PDC基因的上游,根據(jù)
     
    和PDC基因編碼序列設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR.利用質(zhì)粒A(圖1)構(gòu)建含有PDC基因啟動(dòng)子片段的重組質(zhì)粒并導(dǎo)入代謝缺陷型酵母菌,用不含
     
    的培養(yǎng)基可篩選出成功轉(zhuǎn)化的酵母菌Y1H。
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    ②質(zhì)粒G(圖2)上的AD基因表達(dá)出的AD蛋白與啟動(dòng)子足夠靠近時(shí),能夠激活后續(xù)基因轉(zhuǎn)錄,因此需獲得待測(cè)蛋白與AD蛋白的融合蛋白用于后續(xù)篩選。科研人員從中國(guó)甜柿中提取RNA,將逆轉(zhuǎn)錄形成的各種cDNA與質(zhì)粒G連接后導(dǎo)入酵母菌,此時(shí)應(yīng)選擇質(zhì)粒G中的位點(diǎn)
     
    (填序號(hào)1~5)作為cDNA的插入位點(diǎn),最終獲得攜帶不同cDNA片段的酵母菌群Y187。
    ③重組酵母Y187與Y1H能夠進(jìn)行接合生殖,形成的接合子含有兩種酵母菌質(zhì)粒上的所有基因。若接合子能在含有金擔(dān)子素的培養(yǎng)基中生存,則推測(cè)待測(cè)蛋白是PDC基因的調(diào)控蛋白,請(qǐng)結(jié)合圖示闡述作出該推測(cè)的理由。

    發(fā)布:2024/11/11 0:0:2組卷:82引用:2難度:0.7
  • 菁優(yōu)網(wǎng)2.限制酶a、限制酶b能將某線性DNA分子片段切割,其識(shí)別序列和切割位點(diǎn)如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/10 15:30:3組卷:21引用:5難度:0.7
  • 3.某一質(zhì)粒載體如圖甲所示,Ampr表示氨芐青霉素抗性基因,Tett表示四環(huán)素抗性基因。有人將此質(zhì)粒載體用BamHⅠ酶切后,與用BamHⅠ酶切獲得的目的基因混合,加入DNA連接酶進(jìn)行連接反應(yīng),用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化后得到多種大腸桿菌,并利用培養(yǎng)基乙和丙篩選出導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌。下列敘述錯(cuò)誤的是(  )
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    發(fā)布:2024/11/10 9:0:1組卷:59引用:4難度:0.6
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