水蛭素是一種小分子蛋白質(zhì)，其對凝血酶有極強(qiáng)的抑制作用，是迄今為止所發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)凝血酶天然特異抑制劑。通過基因工程技術(shù)生產(chǎn)水蛭素的方法如下圖所示。請據(jù)圖回答：
（1）過程①需要的原料是脫氧核苷酸（dNTP或dATP、dGTP、dCTP、dTTP）脫氧核苷酸（dNTP或dATP、dGTP、dCTP、dTTP），過程③必需的酶有限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶，過程④為提高導(dǎo)入效率，常用CaCl2CaCl2溶液處理大腸桿菌。
（2）過程②中可通過PCRPCR技術(shù)大量擴(kuò)增水蛭素基因，被擴(kuò)增的水蛭素基因必須有一段核苷酸序列是已知的，以便根據(jù)這一序列合成引物引物。
（3）水蛭素基因不含質(zhì)粒圖譜中限制酶識別序列。為使水蛭素基因重組進(jìn)該質(zhì)粒，水蛭素基因兩端需分別加入不同限制酶AscⅠAscⅠ和BamHⅠBamHⅠ的識別序列。
（4）在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后，過程⑤為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，一般需要用添加卡那霉素卡那霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】脫氧核苷酸（dNTP或dATP、dGTP、dCTP、dTTP）；限制酶和DNA連接酶；CaCl2；PCR；引物；AscⅠ；BamHⅠ；卡那霉素
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/9/12 0:0:8組卷：243引用：2難度：0.7
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
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發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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