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人血清白蛋白(HSA)是人血漿中的主要蛋白質(zhì),臨床上用于肝硬化、糖尿病性腎病等疾病治療。經(jīng)過幾十年的發(fā)展,科學(xué)家們應(yīng)用轉(zhuǎn)基因技術(shù),已實(shí)現(xiàn)在大腸桿菌、牛乳腺細(xì)胞和苜蓿(一種豆科植物)中規(guī)?;a(chǎn)HSA。請回答以下問題:
(1)科學(xué)家通過PCR技術(shù)擴(kuò)增HSA基因,該技術(shù)的原理是
DNA雙鏈復(fù)制
DNA雙鏈復(fù)制
,通過
加熱
加熱
使DNA解鏈為單鏈,冷卻至55~60℃后再加熱至70~75℃Taq酶從
至90~95℃引物
至90~95℃引物
開始進(jìn)行互補(bǔ)鏈的合成。
(2)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的核心步驟是
基因表達(dá)載體的構(gòu)建
基因表達(dá)載體的構(gòu)建
。為使導(dǎo)入大腸桿菌和苜蓿細(xì)胞中的目的基因能夠表達(dá),目的基因的上游和下游應(yīng)分別具有
啟動(dòng)子和終止子
啟動(dòng)子和終止子
元件;標(biāo)記基因的作用是
鑒定并篩選導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞
鑒定并篩選導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞

(3)與大腸桿菌相比,牛乳腺細(xì)胞和苜蓿等生物反應(yīng)器所獲得的HSA更符合人們的需求,原因是
大腸桿菌為原核生物,牛乳腺細(xì)胞、苜蓿等真核生物有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等復(fù)雜的細(xì)胞器,能對來自核糖體的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工,生成具有生物活性的HSA
大腸桿菌為原核生物,牛乳腺細(xì)胞、苜蓿等真核生物有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等復(fù)雜的細(xì)胞器,能對來自核糖體的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工,生成具有生物活性的HSA
。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】DNA雙鏈復(fù)制;加熱;至90~95℃引物;基因表達(dá)載體的構(gòu)建;啟動(dòng)子和終止子;鑒定并篩選導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞;大腸桿菌為原核生物,牛乳腺細(xì)胞、苜蓿等真核生物有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等復(fù)雜的細(xì)胞器,能對來自核糖體的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工,生成具有生物活性的HSA
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:12引用:2難度:0.6
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  • 1.基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速,如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/11/14 7:0:1組卷:62引用:7難度:0.7
  • 2.經(jīng)由食物攝取過量生物胺會(huì)引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應(yīng),嚴(yán)重時(shí)甚至危及生命,因此必須對食品中生物胺的含量進(jìn)行減控。微生物來源的多銅氧化酶(MCO)能高效分解生物胺,基于基因工程規(guī)?;a(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因,然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實(shí)現(xiàn)了高效表達(dá)。
    (1)通過上述基因工程技術(shù)獲取目標(biāo)產(chǎn)物,涉及如下步驟,則合理的操作步驟排序是
     
    (填寫下列編號)。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細(xì)胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)?;a(chǎn)目標(biāo)蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
    ⑤目的基因和運(yùn)載體重組構(gòu)建表達(dá)載體
    (2)在PCR過程中,引物的功能是
     
    。
    A.啟動(dòng)DNA復(fù)制
    B.規(guī)定擴(kuò)增區(qū)間
    C.解旋DNA雙鏈
    D.充當(dāng)復(fù)制模板
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    (3)為獲得目的基因MCO(圖甲灰色表示的序列),正確設(shè)計(jì)的PCR引物應(yīng)為圖甲中的
     
    。
    (4)獲取目的基因后,需要和載體重組導(dǎo)入受體細(xì)胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是
     
    (填DNA或RNA/DNA或RNA)。
    (5)在常規(guī)PCR的每一輪擴(kuò)增反應(yīng)中,溫度隨時(shí)間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    (6)若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端,那么載體質(zhì)粒pCLY15(圖丙中圖1)需用
     
     
    切開,才能與MCO片段高效連接。
    (7)下列實(shí)驗(yàn)操作中,能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     

    A.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,用合適的限制酶切割
    B.在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑,以克隆的顏色進(jìn)行鑒別
    C.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,以此為模板進(jìn)行PCR檢測
    D.將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc(四環(huán)素)的平板上,根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布:2024/11/14 4:30:2組卷:29引用:3難度:0.5
  • 3.用限制酶EcoRⅤ單獨(dú)切割某普通質(zhì)粒,可產(chǎn)生14kb(1kb即1000個(gè)堿基對)的長鏈,而同時(shí)用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒,可得到三種長度的DNA片段,見圖(其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個(gè)黏性末端)。
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    若用MboⅠ限制酶單獨(dú)切割該普通質(zhì)粒,則產(chǎn)生的DNA片段的長度為( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/14 4:0:2組卷:89引用:9難度:0.7
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