22.土壤中富含有機營養(yǎng)和無機營養(yǎng),可為多種微生物提供生活所需的營養(yǎng)物質(zhì),土壤中微生物種類豐富。農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中施用的尿素必須由土壤中分解尿素的細菌將其分解后才能被農(nóng)作物吸收利用,所以,在施用尿素的農(nóng)田土壤中含有大量分解尿素的細菌。某生物興趣小組開展了“分離土壤中分解尿素的細菌并進行計數(shù)”的實驗。請分析回答下列問題。
(1)培養(yǎng)基配方:KH
2PO
41.4g,Na
2HPO
42.1g,MgSO
4?7H
2O0.2g,葡萄糖10.0g,尿素1.0g,蒸餾水1000mL,瓊脂,無菌水及調(diào)節(jié)pH的試劑等。
①該培養(yǎng)基中葡萄糖的作用是
,培養(yǎng)基中作為唯一氮源的物質(zhì)是
;從功能上看,該培養(yǎng)基屬于
培養(yǎng)基。
②培養(yǎng)基中添加一定量KH
2PO
4和Na
2HPO
4,請分析所起的作用(至少說出兩點)
。
③分析培養(yǎng)基成分和實驗目的,所用培養(yǎng)基的物理狀態(tài)為
。
(2)土壤取樣:用鐵鏟取表層以下3~8cm的土壤10g,并裝在信封中備用。所用鐵鏟和信封在使用前都需要
。
(3)制備土壤懸液:在酒精燈火焰旁,稱取1g土壤樣品,倒入盛有99mL
的錐形瓶中,按要求制成10
-2g/mL的土壤懸液。并進行一系列的梯度稀釋,獲得一系列濃度不同的土壤懸液。培養(yǎng)基配制及平板制作。
(4)接種:從濃度最低的土壤懸液開始,分別吸取0.1mL懸液,采用
法將其接種到平板表面。在這一步驟中,下列選項不需要的是
。(填序號)
①酒精燈
②培養(yǎng)皿
③顯微鏡
④接種環(huán)
⑤涂布器
(5)培養(yǎng)與觀察,計數(shù)菌落:按要求進行培養(yǎng),并每24h觀察一次每個培養(yǎng)皿中的細菌菌落。計數(shù)時,選取菌落數(shù)為
的一組為樣本進行統(tǒng)計。