25.二甲雙胍(Met)是廣泛應(yīng)用于臨床的降血糖藥物,近年來發(fā)現(xiàn)它還可降低腫瘤發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。
(1)細(xì)胞發(fā)生癌變的根本原因是
。由于癌細(xì)胞表面
,易在體內(nèi)擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移。
(2)為探究Met對(duì)肝癌細(xì)胞增殖的影響,用含不同濃度Met的培養(yǎng)液培養(yǎng)肝癌細(xì)胞,結(jié)果如圖1,該結(jié)果表明
。用流式細(xì)胞儀測定各組處于不同時(shí)期的細(xì)胞數(shù)量,結(jié)果如圖2,由此推測Met可將肝癌細(xì)胞的增殖阻滯在
期。
(3)為進(jìn)一步研究Met的作用機(jī)制,研究人員用含1mmol/L Met的培養(yǎng)液培養(yǎng)肝癌細(xì)胞12h后,結(jié)果發(fā)現(xiàn)呼吸鏈復(fù)合物Ⅰ的活性下降。
①呼吸鏈復(fù)合物Ⅰ位于
上,參與有氧呼吸第三階段(電子傳遞)。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測Met通過減少
供應(yīng),抑制肝癌細(xì)胞的增殖。
②另一方面,Met對(duì)癌細(xì)胞呼吸的影響導(dǎo)致線粒體內(nèi)AMP/ATP比值
,使AMPK磷酸化而被激活。(注:AMP為腺苷一磷酸)
③激活的AMPK(P-AMPK)可通過圖3所示的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑抑制分裂相關(guān)蛋白的合成,從而抑制肝癌細(xì)胞的增殖。測定各組肝癌細(xì)胞中相關(guān)物質(zhì)的含量,電泳結(jié)果如圖4.由于細(xì)胞中β-Actin蛋白的表達(dá)量
,在實(shí)驗(yàn)中可作為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照,以排除細(xì)胞取樣量、檢測方法等無關(guān)變量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。結(jié)合圖3、4,闡述P-AMPK抑制肝癌細(xì)胞增殖的機(jī)制
。