“微衛(wèi)星DNA”是一類廣泛分布于真核生物核DNA中的簡單重復(fù)序列,以1~6個核苷酸為基本單位,重復(fù)次數(shù)在不同個體和品種間有較大可變性,可作為一種標(biāo)記對基因進行定位。
(1)由于兩側(cè)序列高度保守,可利用PCR技術(shù)對重復(fù)次數(shù)不同的微衛(wèi)星DNA加以鑒定,如圖1.請在方框中補充C組PCR產(chǎn)物電泳結(jié)果的大致位置。
(2)研究人員以純種紫心大白菜為父本、純種非紫心大白菜為母本進行雜交,F(xiàn)1自交后共收獲F2植株330株,其中紫心245株,非紫心85株。實驗結(jié)果表明紫心紫心是顯性性狀,推測相關(guān)基因的傳遞符合基因分離基因分離定律。
(3)為了對大白菜的紫心基因進行有效標(biāo)記和定位,研究人員針對已知的微衛(wèi)星標(biāo)記A710兩側(cè)序列設(shè)計引物,并對兩親本和部分F2個體的DNA進行PCR擴增,產(chǎn)物電泳結(jié)果如圖2.由此初步推測:大白菜紫心、非紫心基因與標(biāo)記A710位于同一對染色體上。圖2紫心F2單株中,最可能是雜合子的有3、4、6、7、83、4、6、7、8(填數(shù)字編號)。若上述推測成立,請解釋非紫心F2單株中10號和12號擴增后的電泳結(jié)果在F1形成配子過程中,(紫色基因與A710位點之間的染色體片段)發(fā)生了交叉互換,形成了同時含非紫心基因和父本A710標(biāo)記的配子在F1形成配子過程中,(紫色基因與A710位點之間的染色體片段)發(fā)生了交叉互換,形成了同時含非紫心基因和父本A710標(biāo)記的配子。
(4)研究人員發(fā)現(xiàn),位于標(biāo)記A710附近的Br基因內(nèi)部存在CTC重復(fù)序列,且該序列在兩親本中重復(fù)次數(shù)不同,如圖3所示。對全部F2個體中的Br基因片段進行PCR擴增,如果全部紫心單株全部紫心單株個體的擴增結(jié)果中有長度為78個堿基對的片段,部分紫心單株、全部非紫心單株部分紫心單株、全部非紫心單株個體的擴增結(jié)果中有長度為87個堿基對的片段,則可證明大白菜紫心和非紫心基因與Br基因位于同一對染色體上且完全連鎖,由此可知Br基因可對大白菜紫心基因進行更有效的標(biāo)記和定位。
(5)根據(jù)“微衛(wèi)星DNA”的特點判斷,應(yīng)用這種標(biāo)記可進行的研究有ABDABD(填字母)。
A.人類親子鑒定 B.物種或品種間親緣關(guān)系鑒定
C.誘導(dǎo)基因突變 D.物種和基因多樣性研究
【答案】;紫心;基因分離;3、4、6、7、8;在F1形成配子過程中,(紫色基因與A710位點之間的染色體片段)發(fā)生了交叉互換,形成了同時含非紫心基因和父本A710標(biāo)記的配子;全部紫心單株;部分紫心單株、全部非紫心單株;ABD
【解答】
【點評】
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限制酶 BclⅠ NotⅠ XbaⅠ San3AⅠ 識別序列及切割位點 T↓GATCA GC↓GGCCGC T↓CTAGA ↓GATC
a 5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
b 5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
c 5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
d 5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
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