某科研人員從蘇云金芽孢桿菌中獲取BT毒蛋白基因,并將其導(dǎo)入大豆葉肉細(xì)胞,培育出抗蟲(chóng)的轉(zhuǎn)基因大豆,主要過(guò)程如下?;卮鹣铝袉?wèn)題:
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(1)質(zhì)粒上存在潮霉素抗性基因的目的是 檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。
(2)過(guò)程①表示利用PCR獲取BT毒蛋白基因,其前提是 根據(jù)BT毒蛋白基因兩端的核苷酸序列合成引物根據(jù)BT毒蛋白基因兩端的核苷酸序列合成引物;在BT毒蛋白基因兩側(cè)分別添加HindⅢ和BamHI限制酶序列,其目的是 讓BT毒蛋白基因與質(zhì)粒定向連接讓BT毒蛋白基因與質(zhì)粒定向連接。
(3)過(guò)程①中BT毒蛋白基因連續(xù)擴(kuò)增5次,形成 3232個(gè)BT毒蛋白基因片段,需要 6262個(gè)引物。
(4)過(guò)程②構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí),將BT毒蛋白基因插入啟動(dòng)子和終止子之間的原因是 保證BT毒蛋白基因能夠在大豆細(xì)胞中表達(dá)保證BT毒蛋白基因能夠在大豆細(xì)胞中表達(dá)。
(5)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌時(shí),需要用 Ca2+Ca2+處理農(nóng)桿菌,使其處于一種能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。過(guò)程③篩選具有抗蟲(chóng)能力的大豆,從分子水平上檢測(cè)BT毒蛋白基因是否表達(dá)的方法是 抗原—抗體雜交抗原—抗體雜交。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái);根據(jù)BT毒蛋白基因兩端的核苷酸序列合成引物;讓BT毒蛋白基因與質(zhì)粒定向連接;32;62;保證BT毒蛋白基因能夠在大豆細(xì)胞中表達(dá);Ca2+;抗原—抗體雜交
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:9引用:3難度:0.7
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2.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫(kù)中獲得?;蛭膸?kù)包括
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