如圖1表示某生物DNA結(jié)構(gòu)的一部分及限制酶的識別序列和酶切位點(diǎn),請回答以下問題。
限制酶 | EcoRⅠ | BamHⅠ | HindlⅢ | SacⅠ |
識別序列和切割位點(diǎn) | G↓AATTC | G↓GATCC | A↓AGCTT | GAGCT↓C |
引物、原料(或脫氧核苷酸或dNTP)、酶(Taq酶)
引物、原料(或脫氧核苷酸或dNTP)、酶(Taq酶)
,一般要經(jīng)歷多次循環(huán),每次循環(huán)可以分為 變性、復(fù)性、延伸
變性、復(fù)性、延伸
三步。擴(kuò)增后切割目的基因,應(yīng)使用表中的限制酶是 EcoRI和SacI
EcoRI和SacI
,這樣做的原因是 可以防止目的基因和Ti質(zhì)粒自身環(huán)化(保證Ti質(zhì)粒與目的基因的正確連接)
可以防止目的基因和Ti質(zhì)粒自身環(huán)化(保證Ti質(zhì)粒與目的基因的正確連接)
。(2)若目的基因?yàn)橐葝u素基因,科研人員構(gòu)建了如圖2所示的重組載體,tetr為四環(huán)素抗性基因,ampr為氨芐青霉素抗性基因。構(gòu)建重組載體需要的酶有
DNA連接酶和限制酶
DNA連接酶和限制酶
。在重組質(zhì)粒上插入大腸桿菌復(fù)制原點(diǎn)的目的是 使重組載體能在大腸桿菌中復(fù)制擴(kuò)增
使重組載體能在大腸桿菌中復(fù)制擴(kuò)增
。圖2中的啟動子上有 RNA聚合酶
RNA聚合酶
的識別和結(jié)合位點(diǎn),從而驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄。將重組載體導(dǎo)入大腸桿菌體內(nèi)后,將其涂布于含 氨芐青霉素
氨芐青霉素
的選擇培養(yǎng)基上。【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】引物、原料(或脫氧核苷酸或dNTP)、酶(Taq酶);變性、復(fù)性、延伸;EcoRI和SacI;可以防止目的基因和Ti質(zhì)粒自身環(huán)化(保證Ti質(zhì)粒與目的基因的正確連接);DNA連接酶和限制酶;使重組載體能在大腸桿菌中復(fù)制擴(kuò)增;RNA聚合酶;氨芐青霉素
【解答】
【點(diǎn)評】
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