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如圖1表示某生物DNA結(jié)構(gòu)的一部分及限制酶的識別序列和酶切位點，請回答以下問題。
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限制酶 EcoRⅠ BamHⅠ HindlⅢ SacⅠ
識別序列和切割位點 G↓AATTC G↓GATCC A↓AGCTT GAGCT↓C
（1）若目的基因為抗蟲基因，需要在連接Ti質(zhì)粒前進行PCR擴增，需要在樣本中再加入
引物、原料（或脫氧核苷酸或dNTP）、酶（Taq酶）
引物、原料（或脫氧核苷酸或dNTP）、酶（Taq酶）
，一般要經(jīng)歷多次循環(huán)，每次循環(huán)可以分為
變性、復(fù)性、延伸
變性、復(fù)性、延伸
三步。擴增后切割目的基因，應(yīng)使用表中的限制酶是
EcoRI和SacI
EcoRI和SacI
，這樣做的原因是
可以防止目的基因和Ti質(zhì)粒自身環(huán)化（保證Ti質(zhì)粒與目的基因的正確連接）
可以防止目的基因和Ti質(zhì)粒自身環(huán)化（保證Ti質(zhì)粒與目的基因的正確連接）
。
（2）若目的基因為胰島素基因，科研人員構(gòu)建了如圖2所示的重組載體，tetr為四環(huán)素抗性基因，ampr為氨芐青霉素抗性基因。構(gòu)建重組載體需要的酶有
DNA連接酶和限制酶
DNA連接酶和限制酶
。在重組質(zhì)粒上插入大腸桿菌復(fù)制原點的目的是
使重組載體能在大腸桿菌中復(fù)制擴增
使重組載體能在大腸桿菌中復(fù)制擴增
。圖2中的啟動子上有
RNA聚合酶
RNA聚合酶
的識別和結(jié)合位點，從而驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄。將重組載體導(dǎo)入大腸桿菌體內(nèi)后，將其涂布于含
氨芐青霉素
氨芐青霉素
的選擇培養(yǎng)基上。

【答案】引物、原料（或脫氧核苷酸或dNTP）、酶（Taq酶）；變性、復(fù)性、延伸；EcoRI和SacI；可以防止目的基因和Ti質(zhì)粒自身環(huán)化（保證Ti質(zhì)粒與目的基因的正確連接）；DNA連接酶和限制酶；使重組載體能在大腸桿菌中復(fù)制擴增；RNA聚合酶；氨芐青霉素
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：36引用：5難度：0.5
相似題

  • 1．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（　　）
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    發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

  • 2．經(jīng)由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應(yīng)，嚴重時甚至危及生命，因此必須對食品中生物胺的含量進行減控。微生物來源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)?；a(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實現(xiàn)了高效表達。
    （1）通過上述基因工程技術(shù)獲取目標產(chǎn)物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是
     
    （填寫下列編號）。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)模化生產(chǎn)目標蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細胞
    ⑤目的基因和運載體重組構(gòu)建表達載體
    （2）在PCR過程中，引物的功能是
     
    。
    A．啟動DNA復(fù)制
    B．規(guī)定擴增區(qū)間
    C．解旋DNA雙鏈
    D．充當復(fù)制模板
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    （3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設(shè)計的PCR引物應(yīng)為圖甲中的
     
    。
    （4）獲取目的基因后，需要和載體重組導(dǎo)入受體細胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是
     
    （填DNA或RNA/DNA或RNA）。
    （5）在常規(guī)PCR的每一輪擴增反應(yīng)中，溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    （6）若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質(zhì)粒pCLY15（圖丙中圖1）需用
     
    和
     
    切開，才能與MCO片段高效連接。
    （7）下列實驗操作中，能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，用合適的限制酶切割
    B．在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑，以克隆的顏色進行鑒別
    C．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，以此為模板進行PCR檢測
    D．將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5

  • 3．用限制酶EcoRⅤ單獨切割某普通質(zhì)粒，可產(chǎn)生14kb（1kb即1000個堿基對）的長鏈，而同時用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒，可得到三種長度的DNA片段，見圖（其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個黏性末端）。
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    若用MboⅠ限制酶單獨切割該普通質(zhì)粒，則產(chǎn)生的DNA片段的長度為（　?。?/h2>

    發(fā)布：2024/11/14 4:0:2組卷：89引用：9難度：0.7
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