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如圖1表示某生物DNA結(jié)構(gòu)的一部分及限制酶的識別序列和酶切位點,請回答以下問題。
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限制酶 EcoRⅠ BamHⅠ HindlⅢ SacⅠ
識別序列和切割位點 GAATTC GGATCC AAGCTT GAGCTC
(1)若目的基因為抗蟲基因,需要在連接Ti質(zhì)粒前進(jìn)行PCR擴(kuò)增,需要在樣本中再加入
引物、原料(或脫氧核苷酸或dNTP)、酶(Taq酶)
引物、原料(或脫氧核苷酸或dNTP)、酶(Taq酶)
,一般要經(jīng)歷多次循環(huán),每次循環(huán)可以分為
變性、復(fù)性、延伸
變性、復(fù)性、延伸
三步。擴(kuò)增后切割目的基因,應(yīng)使用表中的限制酶是
EcoRI和SacI
EcoRI和SacI
,這樣做的原因是
可以防止目的基因和Ti質(zhì)粒自身環(huán)化(保證Ti質(zhì)粒與目的基因的正確連接)
可以防止目的基因和Ti質(zhì)粒自身環(huán)化(保證Ti質(zhì)粒與目的基因的正確連接)
。
(2)若目的基因為胰島素基因,科研人員構(gòu)建了如圖2所示的重組載體,tetr為四環(huán)素抗性基因,ampr為氨芐青霉素抗性基因。構(gòu)建重組載體需要的酶有
DNA連接酶和限制酶
DNA連接酶和限制酶
。在重組質(zhì)粒上插入大腸桿菌復(fù)制原點的目的是
使重組載體能在大腸桿菌中復(fù)制擴(kuò)增
使重組載體能在大腸桿菌中復(fù)制擴(kuò)增
。圖2中的啟動子上有
RNA聚合酶
RNA聚合酶
的識別和結(jié)合位點,從而驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄。將重組載體導(dǎo)入大腸桿菌體內(nèi)后,將其涂布于含
氨芐青霉素
氨芐青霉素
的選擇培養(yǎng)基上。

【答案】引物、原料(或脫氧核苷酸或dNTP)、酶(Taq酶);變性、復(fù)性、延伸;EcoRI和SacI;可以防止目的基因和Ti質(zhì)粒自身環(huán)化(保證Ti質(zhì)粒與目的基因的正確連接);DNA連接酶和限制酶;使重組載體能在大腸桿菌中復(fù)制擴(kuò)增;RNA聚合酶;氨芐青霉素
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:36引用:5難度:0.5
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    發(fā)布:2024/12/20 5:0:2組卷:35引用:5難度:0.6
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    (1)獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有
     
    (答出2項)等。
    (2)為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒,應(yīng)該選擇
     
    (填酶)切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入
     
    (填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”)對目的基因進(jìn)行篩選。
    (3)培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程
     
    (填序號)。過程②③采用的方法是
     
    。
    (4)⑤過程需要用到
     
    等植物激素,在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中,這兩種植物激素的比例會發(fā)生變化,原因是
     
    。

    發(fā)布:2024/12/20 2:30:1組卷:16引用:5難度:0.5
  • 3.如表為5種限制酶的識別序列及切割位點,如圖為某種質(zhì)粒和目的基因,箭頭所指為限制酶酶切位點?,F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中,以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是( ?。?
    限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ
    識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG
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    發(fā)布:2024/12/20 3:30:1組卷:6引用:1難度:0.6
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