當(dāng)前位置：
試題詳情
安莎霉素是一類(lèi)主要由海洋來(lái)源的稀有放線(xiàn)菌產(chǎn)生的活性大環(huán)內(nèi)酰胺類(lèi)次級(jí)代謝產(chǎn)物，具有較高的抗菌活性和藥用價(jià)值?？蒲腥藛T通常從深海采集淤泥樣本，再分離、純化并篩選出產(chǎn)安莎霉素的放線(xiàn)菌。一株海洋來(lái)源的稀有放線(xiàn)菌的分離培養(yǎng)流程如圖甲所示。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：
（1）過(guò)程①的接種方法為稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法。
（2）統(tǒng)計(jì)菌落種類(lèi)和數(shù)量時(shí)要每隔24h觀察統(tǒng)計(jì)一次，直到各類(lèi)菌落數(shù)目穩(wěn)定，以防止培養(yǎng)時(shí)間不足導(dǎo)致遺漏菌落的種類(lèi)和數(shù)目遺漏菌落的種類(lèi)和數(shù)目，或培養(yǎng)時(shí)間太長(zhǎng)導(dǎo)致菌落粘連影響計(jì)數(shù)、培養(yǎng)基表面干燥脫水菌落粘連影響計(jì)數(shù)、培養(yǎng)基表面干燥脫水。
（3）研究人員發(fā)現(xiàn)產(chǎn)安莎霉素的放線(xiàn)菌具有一個(gè)普遍的共性--氨基酸缺陷型，從培養(yǎng)基成分分析，基本培養(yǎng)基與完全培養(yǎng)基存在差異的成分是氨基酸氨基酸。為了初步鑒定營(yíng)養(yǎng)缺陷型放線(xiàn)菌菌株，科研人員進(jìn)行了如下操作：
①用接種針挑取菌落A菌落A（填“菌落A”或“菌落B”）接種于盛有完全液體培養(yǎng)基的離心管中，28℃振蕩培養(yǎng)3～5天后，離心取沉淀物，用無(wú)菌水洗滌3次制成菌懸液。
②吸取1mL菌懸液加入無(wú)菌培養(yǎng)皿中，傾注15mL融化并冷卻至50℃左右的基本培養(yǎng)基，待其冷凝后用記號(hào)筆在皿底皿底（“皿蓋”或“皿底”）劃分五個(gè)區(qū)域，標(biāo)記A、B、C、D、E。
③在劃分的五個(gè)區(qū)域上放入少量分組的氨基酸粉末（如下表所示），經(jīng)培養(yǎng)后，觀察生長(zhǎng)圈出現(xiàn)的區(qū)域，從而確定屬于何種氨基酸缺陷型。
| 組別 | 所含氨基酸 | ||||
| A | 組氨酸 | 蘇氨酸 | 谷氨酸 | 天冬氨酸 | 亮氨酸 |
| B | 精氨酸 | 蘇氨酸 | 賴(lài)氨酸 | 甲硫氨酸 | 苯丙氨酸 |
| C | 酪氨酸 | 谷氨酸 | 賴(lài)氨酸 | 色氨酸 | 丙氨酸 |
| D | 甘氨酸 | 天冬氨酸 | 甲硫氨酸 | 色氨酸 | 絲氨酸 |
| E | 半胱氨酸 | 亮氨酸 | 苯丙氨酸 | 丙氨酸 | 絲氨酸 |
天冬氨酸
天冬氨酸
缺陷型。（4）科研人員分離、純化出產(chǎn)安莎霉素的放線(xiàn)菌后，需要利用PCR技術(shù)大量擴(kuò)增其染色體上的16SrRNA保守片段，然后通過(guò)DNA序列比對(duì)進(jìn)行菌種親緣關(guān)系的鑒定。
①查找數(shù)據(jù)庫(kù)發(fā)現(xiàn)該放線(xiàn)菌的16SrRNA目的基因片段及相應(yīng)限制酶識(shí)別序列如圖乙所示：
| 限制酶 | EcoRⅠ | BamHⅠ | HindⅢ | SacⅠ |
| 識(shí)別序列和切割位點(diǎn) | G↓AATTCG | G↓ATCC | A↓AGCTT | GAGCT↓C |
EcoRⅠ
EcoRⅠ
和SacⅠ
SacⅠ
。得到目的基因以后就可以利用PCR技術(shù)對(duì)16SrRNA進(jìn)行體外擴(kuò)增，此過(guò)程需要加入Taq酶
Taq酶
催化。②聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)對(duì)引物的特異性要求較高，放線(xiàn)菌是一類(lèi)GC含量高的細(xì)菌，設(shè)定退火溫度時(shí)需要適當(dāng)
升高
升高
（填“升高”或“降低”）溫度，為了摸索出最適退火溫度，設(shè)定了55℃、56℃、57℃、58℃四個(gè)溫度梯度，反應(yīng)結(jié)束后，電泳檢測(cè)PCR產(chǎn)物（已知16SrRNA片段大小為1500dp），不同溫度對(duì)應(yīng)的結(jié)果如圖丙所示，1～4四個(gè)泳道中退火溫度較高的是A
A
。A．55℃、56℃、57℃、58℃
B．56℃、55℃、58℃、57℃
C．58℃、57℃、56℃、55℃
D．55℃、58℃、56℃、57℃
【考點(diǎn)】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）；基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】稀釋涂布平板法；遺漏菌落的種類(lèi)和數(shù)目；菌落粘連影響計(jì)數(shù)、培養(yǎng)基表面干燥脫水；氨基酸；菌落A；皿底；天冬氨酸；EcoRⅠ；SacⅠ；Taq酶；升高；A
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書(shū)面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：11引用：1難度：0.6
相似題
-
1．回答下列關(guān)于微生物的問(wèn)題．
阿拉伯膠是一種多糖，研究者從某地合歡樹(shù)下距離地表深10～15cm處的土樣中初篩到能合成阿拉伯膠降解酶的菌株SM01，以下為該菌株的鑒定過(guò)程．
（1）為獲得單菌落，可采用平板劃線(xiàn)法或法將初篩菌液接種在培養(yǎng)基上．46SM01菌落為粉白色，初期呈突起絮狀，在顯微鏡下觀察到，菌絲白色致密，且有分生孢子，細(xì)胞核直徑約1μm,初步推測(cè)為真菌，則其特征中，最能說(shuō)明SM01是真菌的是有細(xì)胞核，且有分生孢子．SM01還一定具有的結(jié)構(gòu)有（多選）．
A．細(xì)胞膜 B．核糖體 C．?dāng)M核 D．莢膜
（2）表中培養(yǎng)液pH均為6.0，若對(duì)SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進(jìn)行測(cè)定，則應(yīng)選用表中的培養(yǎng)液，針對(duì)不選用的其他培養(yǎng)液，分別說(shuō)明原因：
①缺少，SM01不能很好生長(zhǎng)
②具有，會(huì)影響對(duì)SM01自身產(chǎn)生的酶活力的測(cè)定結(jié)果
③缺乏，會(huì)影響SM01的生長(zhǎng)，也無(wú)法對(duì)阿拉伯膠酶活力進(jìn)行測(cè)定．
表 試驗(yàn)用培養(yǎng)液配方培養(yǎng)液 阿拉伯膠 阿拉伯膠酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L發(fā)布：2025/1/2 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.5 -
2．丙草胺（C15H22ClNO2）是一種廣泛應(yīng)用的除草劑，能抑制土壤細(xì)菌、放線(xiàn)菌和真菌的生長(zhǎng)。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細(xì)菌菌株，并對(duì)其計(jì)數(shù)（如圖所示），以期為修復(fù)污染土壤提供微生物資源。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ?。?br />
發(fā)布：2024/12/31 4:0:1組卷：17引用：3難度：0.7 -
3．為了防治大氣污染，煙氣脫硫是環(huán)保領(lǐng)域迫切需要解決的問(wèn)題．研究人員為了獲得用于煙氣脫硫的脫硫細(xì)菌，并了解其生長(zhǎng)規(guī)律，進(jìn)行了如下操作．請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）采樣與細(xì)菌的篩選：在某熱電廠煙囪周?chē)鷧^(qū)域要盡量做到采集土樣．為確保能夠從樣品中分離到所需要的煙氣脫硫細(xì)菌，可以通過(guò)增加脫硫菌的濃度．
（2）馴化脫硫細(xì)菌：將篩選出的脫硫細(xì)菌接種于有少量無(wú)菌水的三角瓶中，邊攪拌邊持續(xù)通入SO2氣體幾分鐘，然后接種到培養(yǎng)基上，待長(zhǎng)出菌落后再重復(fù)上述步驟，并逐步延長(zhǎng)通SO2的時(shí)間，同時(shí)逐步降低培養(yǎng)基的pH．此操作的目的是分離出的脫硫細(xì)菌．
（3）培養(yǎng)與觀察：一般來(lái)說(shuō)，在一定的培養(yǎng)條件下（相同的培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時(shí)間），馴化后的脫硫細(xì)菌表現(xiàn)出穩(wěn)定的特征．用高倍顯微鏡（填“可以”或“不可以”）觀察到脫硫細(xì)菌的核糖體．
（4）探究生長(zhǎng)規(guī)律：在計(jì)數(shù)時(shí)，計(jì)數(shù)方法有稀釋涂布平板法和直接計(jì)數(shù)法．在用稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落來(lái)源于樣品稀釋液中的；通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌，通常推測(cè)統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目．發(fā)布：2025/1/1 8:0:2組卷：6引用：2難度：0.5