圖1為Ti質(zhì)粒酶切圖譜。圖2為含Bt基因(殺蟲毒蛋白基因)的外源DNA片段的限制酶酶切圖譜。圖3表示相關(guān)限制酶的識別序列及切割位點?,F(xiàn)欲通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲棉。回答下列問題:
(1)除四環(huán)素抗性基因和Bt基因外,作為表達載體,該質(zhì)粒至少還應該具有
啟動子、終止子(或復制原點)
啟動子、終止子(或復制原點)
等調(diào)控元件;PstⅠ等的識別序列及切割位點應位于
T-DNA
T-DNA
片段內(nèi),以確保Bt基因隨Ti質(zhì)粒進入棉花細胞后能插入到棉花細胞中的染色體DNA上。
(2)為保證Bt基因與Ti質(zhì)粒的正常連接,應選用
PstⅠ
PstⅠ
酶和MseⅠ酶切割外源DNA,并將Ti質(zhì)粒上的序列“GAATTC”改造為
GAATTAATTC
GAATTAATTC
。
(3)轉(zhuǎn)Bt基因的棉花細胞經(jīng)過
脫分化、再分化
脫分化、再分化
過程可以培育成轉(zhuǎn)基因棉花幼苗;利用抗原—抗體反應等原理,可以檢測轉(zhuǎn)基因抗蟲棉幼葉中的Bt毒蛋白及其含量,以此來檢測
Bt基因是否表達及表達程度
Bt基因是否表達及表達程度
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(4)我國發(fā)放了6種轉(zhuǎn)基因植物進口安全證書,但進口的基本上是轉(zhuǎn)基因棉花的纖維而不是轉(zhuǎn)基因玉米等糧食產(chǎn)品,從轉(zhuǎn)基因技術(shù)安全性的角度分析,原因是
轉(zhuǎn)基因糧食產(chǎn)品用于加工成食品,可能影響人體健康,而轉(zhuǎn)基因棉花的纖維不是用于加工成食品
轉(zhuǎn)基因糧食產(chǎn)品用于加工成食品,可能影響人體健康,而轉(zhuǎn)基因棉花的纖維不是用于加工成食品
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