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結(jié)核病是由結(jié)核桿菌引起的人畜共患病。結(jié)核桿菌通常以氣溶膠形式傳播，氣溶膠顆粒被肺泡吞噬細胞吞噬，吞噬細胞破裂導(dǎo)致結(jié)核桿菌在機體內(nèi)進一步傳播。羊癢病是由正常細胞的非致病性朊蛋白異構(gòu)化為癢病朊蛋白所致。為研制既能抗結(jié)核病又能抗羊癢病的雙抗羊，科學(xué)家進行了如圖操作。
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（1）小鼠SP110基因是目前發(fā)現(xiàn)的具有抗結(jié)核桿菌感染功能的基因。為了驗證SP110基因的功能，同時也為了驗證山羊吞噬細胞特異性啟動子MSR可以啟動SP110基因在吞噬細胞內(nèi)的表達，設(shè)計以下三組實驗。實驗組將MRS啟動子與小鼠SP110基因形成融合基因，用
限制酶和DNA連接酶
限制酶和DNA連接酶
將融合基因與質(zhì)粒構(gòu)建成重組質(zhì)粒，導(dǎo)入山羊肺泡吞噬細胞（組2）。以
轉(zhuǎn)入廣泛表達小鼠SP110基因的重組質(zhì)粒的山羊吞噬細胞
轉(zhuǎn)入廣泛表達小鼠SP110基因的重組質(zhì)粒的山羊吞噬細胞
（組3）和轉(zhuǎn)入空質(zhì)粒的山羊吞噬細胞為對照組（組1）。分別接種等量的結(jié)核桿菌，72h后加入
蒸餾水
蒸餾水
使吞噬細胞破裂，取裂解液進行涂布培養(yǎng)，結(jié)果如圖1。由圖可知小鼠SP110基因可用于雙抗羊的研制，依據(jù)是
組2的吞噬細胞裂解后釋放的結(jié)核桿菌數(shù)量與組3接近，顯著小于組1
組2的吞噬細胞裂解后釋放的結(jié)核桿菌數(shù)量與組3接近，顯著小于組1
。
（2）非致病性朊蛋白是由山羊13號染色體上的PRNP基因的第三外顯子控制合成的，PRNP基因的結(jié)構(gòu)如圖2。以L4和R1為識別位點設(shè)計TALEN敲除載體，對山羊成纖維細胞L4與R1之間的序列實施定點敲除。然后，將TALEN敲除載體與供體DNA載體共轉(zhuǎn)化幼羊成纖維細胞，可將SP110基因定點敲入PRNP基因的第三外顯子中，原理如圖3。請指出圖4中的數(shù)字分別代表的結(jié)構(gòu)。1
L4序列
L4序列
，2
MRS啟動子
MRS啟動子
，3
終止子
終止子
，4
R1序列
R1序列
。經(jīng)
抗原抗體雜交技術(shù)
抗原抗體雜交技術(shù)
檢測，山羊成纖維細胞中非致病性朊蛋白基因和SP110基因的表達情況是
均降低（不表達）
均降低（不表達）
。
（3）欲用上述細胞獲得雙抗羊，需要用到的技術(shù)有
體細胞核移植、動物細胞培養(yǎng)（早期胚胎培養(yǎng)）、胚胎移植
體細胞核移植、動物細胞培養(yǎng)（早期胚胎培養(yǎng)）、胚胎移植
（至少寫出三項）。

【答案】限制酶和DNA連接酶；轉(zhuǎn)入廣泛表達小鼠SP110基因的重組質(zhì)粒的山羊吞噬細胞；蒸餾水；組2的吞噬細胞裂解后釋放的結(jié)核桿菌數(shù)量與組3接近，顯著小于組1；L4序列；MRS啟動子；終止子；R1序列；抗原抗體雜交技術(shù)；均降低（不表達）；體細胞核移植、動物細胞培養(yǎng)（早期胚胎培養(yǎng)）、胚胎移植
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/8/2 8:0:9組卷：15引用：3難度：0.6
相似題

  • 1．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（　　）
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    發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

  • 2．經(jīng)由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應(yīng)，嚴重時甚至危及生命，因此必須對食品中生物胺的含量進行減控。微生物來源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)?；a(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實現(xiàn)了高效表達。
    （1）通過上述基因工程技術(shù)獲取目標產(chǎn)物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是
     
    （填寫下列編號）。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)模化生產(chǎn)目標蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細胞
    ⑤目的基因和運載體重組構(gòu)建表達載體
    （2）在PCR過程中，引物的功能是
     
    。
    A．啟動DNA復(fù)制
    B．規(guī)定擴增區(qū)間
    C．解旋DNA雙鏈
    D．充當復(fù)制模板
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    （3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設(shè)計的PCR引物應(yīng)為圖甲中的
     
    。
    （4）獲取目的基因后，需要和載體重組導(dǎo)入受體細胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是
     
    （填DNA或RNA/DNA或RNA）。
    （5）在常規(guī)PCR的每一輪擴增反應(yīng)中，溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    （6）若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質(zhì)粒pCLY15（圖丙中圖1）需用
     
    和
     
    切開，才能與MCO片段高效連接。
    （7）下列實驗操作中，能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，用合適的限制酶切割
    B．在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑，以克隆的顏色進行鑒別
    C．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，以此為模板進行PCR檢測
    D．將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5

  • 3．用限制酶EcoRⅤ單獨切割某普通質(zhì)粒，可產(chǎn)生14kb（1kb即1000個堿基對）的長鏈，而同時用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒，可得到三種長度的DNA片段，見圖（其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個黏性末端）。
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    若用MboⅠ限制酶單獨切割該普通質(zhì)粒，則產(chǎn)生的DNA片段的長度為（　?。?/h2>

    發(fā)布：2024/11/14 4:0:2組卷：89引用：9難度：0.7
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