隨著石油危機(jī)的出現(xiàn)，乙醇作為可再生資源中比較理想的液態(tài)燃料正受到人們越來越多的關(guān)注。自然界中可再生的木質(zhì)纖維素資源極為豐富，其主要成分之一是半纖維素。半纖維素容易被酸或者酶水解，其水解產(chǎn)物中的85%～90%為木糖。因此利用木糖發(fā)酵生產(chǎn)乙醇具有重要的應(yīng)用研究價(jià)值。酵母菌是傳統(tǒng)的乙醇生產(chǎn)菌株，因其缺乏轉(zhuǎn)化木糖的酶系而不能很好地利用木糖。自然界中某些釀酒酵母能利用木糖進(jìn)行酒精發(fā)酵，某研究小組欲從土壤中分離這種酵母菌并對(duì)產(chǎn)酶活性進(jìn)行測定，實(shí)驗(yàn)基本流程為：
取土樣→制取土壤懸液→擴(kuò)大培養(yǎng)→選擇培養(yǎng)→菌種分離→酶活性鑒定
請(qǐng)回答下列問題：
（1）擴(kuò)大培養(yǎng)又稱富集培養(yǎng)，可增加

目的菌株數(shù)量

目的菌株數(shù)量

，以確保能夠從樣品中分離得到所需要的微生物。
（2）分離純化微生物的關(guān)鍵是

逐漸將聚集的菌體分散，以得到由單個(gè)細(xì)胞增殖而形成的單個(gè)菌落

逐漸將聚集的菌體分散，以得到由單個(gè)細(xì)胞增殖而形成的單個(gè)菌落

。該研究小組將擴(kuò)大培養(yǎng)后的混合菌液適當(dāng)稀釋后接種于

以木糖為唯一碳源

以木糖為唯一碳源

的選擇培養(yǎng)基，倒置放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。常用的接種方法有

平板劃線法和稀釋涂布平板法

平板劃線法和稀釋涂布平板法

兩種。若劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都長滿了菌落，第二劃線區(qū)域的第一條線上無菌落，其它劃線上有菌落。第二劃線區(qū)域的第一條線上無菌落的原因是

接種環(huán)灼燒滅菌后未冷卻即進(jìn)行劃線操作、未從上次劃線末端開劃線

接種環(huán)灼燒滅菌后未冷卻即進(jìn)行劃線操作、未從上次劃線末端開劃線

。
（3）為進(jìn)一步確定目的菌株的最佳產(chǎn)酶條件，該研究小組選取培養(yǎng)基初始pH、培養(yǎng)溫度、搖床轉(zhuǎn)速以及裝液量4個(gè)因素實(shí)驗(yàn)。其中，培養(yǎng)基初始pH、培養(yǎng)溫度會(huì)影響菌株產(chǎn)酶主要是因?yàn)?!--BA-->

培養(yǎng)基初始pH、培養(yǎng)溫度會(huì)影響酶活性

培養(yǎng)基初始pH、培養(yǎng)溫度會(huì)影響酶活性

；搖床轉(zhuǎn)速因影響

溶氧量、菌種獲取營養(yǎng)物質(zhì)的幾率

溶氧量、菌種獲取營養(yǎng)物質(zhì)的幾率

進(jìn)而影響菌株產(chǎn)酶。