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噬菌體展示技術(shù)是將外源目標(biāo)基因插入到噬菌體外殼蛋白結(jié)構(gòu)基因的適當(dāng)位置,使目標(biāo)蛋白被展示到噬菌體表面的生物技術(shù)(如圖所示)。被展示的蛋白質(zhì)可以保持相對(duì)獨(dú)立的空間結(jié)構(gòu)和生物活性,以利于靶分子的識(shí)別和結(jié)合。請(qǐng)分析回答:
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(1)插入載體之前,目標(biāo)基因一般需經(jīng)PCR擴(kuò)增。PCR擴(kuò)增基因的原理是
DNA的半保留復(fù)制
DNA的半保留復(fù)制
。若目標(biāo)基因的核苷酸序列未知,但已知其臨近區(qū)域的上、下游的部分序列如下所示,請(qǐng)從表中所列引物中選出一對(duì)合適的引物用于目標(biāo)基因的PCR擴(kuò)增:
乙和C
乙和C
。
5′-GACGCATTACGGTAAC??????TCCAGCTTAGCAGTAA-3′
3′-CTGCGTAATGCCATTG??????AGGTCGAATCGTCATT-5′
引物Ⅰ 引物Ⅱ
5′-CTGCGTAATGCCATTG A 5′-AGGTCGAATCGTCATT
5′-GACGCATTACGGTAAC B 5′-TCCAGCTTAGCAGTAA
5′-GTTACCGTAATGCGTC C 5′-TTACTGCTAAGCTGGA
5′-CAATGGCATTACGCAG D 5′-AATGACGATTCGACCT
(2)目標(biāo)基因能夠與噬菌體外殼蛋白結(jié)構(gòu)基因拼接成功,其結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)是
它們的基本組成單位都是脫氧核苷酸,且都具有雙鏈(雙螺旋)結(jié)構(gòu)
它們的基本組成單位都是脫氧核苷酸,且都具有雙鏈(雙螺旋)結(jié)構(gòu)
;建立噬菌體展示庫(kù)需用的工具酶有
限制酶和DNA連接酶
限制酶和DNA連接酶
。
(3)目標(biāo)蛋白的篩選利用了
抗原—抗體雜交
抗原—抗體雜交
方法,其原理是
抗體的結(jié)合具有特異性
抗體的結(jié)合具有特異性

(4)擴(kuò)大培養(yǎng)時(shí),進(jìn)行誘變處理的目的可能是通過(guò)提高某些基因的突變率而獲取
具有更強(qiáng)生產(chǎn)目標(biāo)蛋白能力的噬菌體
具有更強(qiáng)生產(chǎn)目標(biāo)蛋白能力的噬菌體
;根據(jù)噬菌體的特征,擴(kuò)大培養(yǎng)體系中必須含有
宿主細(xì)胞
宿主細(xì)胞
,噬菌體才能繁殖。多次篩選后,
目標(biāo)基因高效表達(dá)
目標(biāo)基因高效表達(dá)
的噬菌體得到高度富集。

【答案】DNA的半保留復(fù)制;乙和C;它們的基本組成單位都是脫氧核苷酸,且都具有雙鏈(雙螺旋)結(jié)構(gòu);限制酶和DNA連接酶;抗原—抗體雜交;抗體的結(jié)合具有特異性;具有更強(qiáng)生產(chǎn)目標(biāo)蛋白能力的噬菌體;宿主細(xì)胞;目標(biāo)基因高效表達(dá)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:4引用:1難度:0.6
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    發(fā)布:2024/11/11 13:0:1組卷:23引用:11難度:0.7
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