人體心肌細(xì)胞中的肌鈣蛋白由三種結(jié)構(gòu)不同的亞基組成,即肌鈣蛋白T(cTnT)、肌鈣蛋白I(cTnI)和肌鈣蛋白C(cTnC),其中cTnI在血液中含量上升是心肌損傷的特異性指標(biāo)。為制備抗cTnI的單克隆抗體,科研人員完成了如圖過程。請據(jù)圖回答下列問題:
(1)給小鼠注射cTnI一段時(shí)間后,若小鼠血清中檢測到 抗cTnI抗體抗cTnI抗體,則可從小鼠 脾臟脾臟中獲取B淋巴細(xì)胞。
(2)誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合可用 聚乙二醇聚乙二醇(寫出一種具體的方法即可),已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑,其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。小鼠淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑,鼠骨髓瘤細(xì)胞中只有D途徑,若圖中①過程將甲細(xì)胞在添加有氨基嘌呤的培養(yǎng)基中培養(yǎng),則只有 雜交瘤雜交瘤細(xì)胞能長期生存,理由是 雜交瘤可以利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖雜交瘤可以利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖。
(3)圖中②過程表示 將乙細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上,進(jìn)行抗體陽性檢測將乙細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上,進(jìn)行抗體陽性檢測,得到的細(xì)胞丙可以在 培養(yǎng)液或小鼠腹腔培養(yǎng)液或小鼠腹腔中大量增殖,從 培養(yǎng)液或小鼠腹水提取培養(yǎng)液或小鼠腹水提取獲得抗cTnI的單克隆抗體。
(4)抗cTnI單克隆抗體可被用作診斷試劑,診斷心肌是否損傷,該過程利用了單克隆抗體的 特異性強(qiáng)、靈敏度高特異性強(qiáng)、靈敏度高特點(diǎn)。
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】抗cTnI抗體;脾臟;聚乙二醇;雜交瘤;雜交瘤可以利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖;將乙細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上,進(jìn)行抗體陽性檢測;培養(yǎng)液或小鼠腹腔;培養(yǎng)液或小鼠腹水提?。惶禺愋詮?qiáng)、靈敏度高
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/7/25 8:0:9組卷:8引用:1難度:0.6
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1.為實(shí)現(xiàn)對肝癌的有效治療,研究人員通過比較肝腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞間的差異,篩選有效的免疫治療靶點(diǎn),制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
(1)檢測發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的CLDN6蛋白能夠促進(jìn)腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)。CLDN6蛋白是一個(gè)跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時(shí),應(yīng)提取
(2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),從該小鼠脾臟中獲取
(3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無關(guān)抗體-DMI)分別處理高表達(dá)CLDN6細(xì)胞和低表達(dá)CLDN6細(xì)胞,檢測細(xì)胞活力,結(jié)果如圖1:
由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞,依據(jù)是
(4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機(jī)制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞的原因是發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6 -
2.2020年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予發(fā)現(xiàn)丙肝病毒的三位科學(xué)家。丙肝病毒引起的丙型肝炎可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化,部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。如圖為利用小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料研制丙肝病毒的單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)流程。下列敘述錯(cuò)誤的是( )
A.在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)液中除營養(yǎng)物質(zhì)外還要添加一定量的血清、血漿 B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,并將其置于含有95%O2加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng) C.圖中篩選1的目的是獲得雜交瘤細(xì)胞 D.若B淋巴細(xì)胞的基因型為HH,骨髓瘤細(xì)胞的基因型為SS,在兩兩融合后,基因型可能有HHSS、HHHH、SSSS 發(fā)布:2024/12/19 6:0:1組卷:42引用:2難度:0.6 -
3.為減少鼠源單克隆抗體可能引起的副作用,某研究團(tuán)隊(duì)對鼠源單克隆抗體F進(jìn)行改造,制備了人—鼠嵌合抗體F′,具體流程為:提取鼠源雜交瘤細(xì)胞RNA,逆轉(zhuǎn)錄后通過PCR擴(kuò)增抗體F的基因序列,將其部分序列用人的相應(yīng)抗體基因序列進(jìn)行替換,再構(gòu)建表達(dá)載體,在體外制備人﹣鼠嵌合抗體F′。為檢測抗體性質(zhì),他們測定了F′單獨(dú)與抗原作用時(shí)對抗原的結(jié)合能力以及F′和F同時(shí)與抗原作用(F′與F初始濃度相同)時(shí)F′對抗原的結(jié)合能力,結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是( ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202304/369/62ee43c5.png" style="vertical-align:middle" />
A.向小鼠注入抗原后提取B淋巴細(xì)胞,與骨髓瘤細(xì)胞融合獲得雜交瘤細(xì)胞 B.可通過將基因表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠細(xì)胞制備嵌合抗體F′ C.據(jù)圖推測,抗體基因序列被替換后改變了與抗原的結(jié)合位點(diǎn) D.在共同作用實(shí)驗(yàn)中,當(dāng)F′濃度較高時(shí),抗原更多與F′結(jié)合 發(fā)布:2024/12/19 1:0:1組卷:39引用:4難度:0.5
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