利用轉(zhuǎn)基因奶牛乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人的生長(zhǎng)激素,需要構(gòu)建一種能高水平表達(dá)的基因表達(dá)載體,選擇合適的基因啟動(dòng)子至關(guān)重要.由于無(wú)法由基因表達(dá)產(chǎn)物推知啟動(dòng)子的堿基序列,運(yùn)用PCR技術(shù)單獨(dú)克隆啟動(dòng)子存在困難.科研人員經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期研究,終于發(fā)明了下圖所示的一種克隆啟動(dòng)子的方法.請(qǐng)分析回答:
(1)培育轉(zhuǎn)基因奶牛時(shí),需要在生長(zhǎng)激素基因編碼序列前插入乳腺蛋白基因乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子;構(gòu)建的基因表達(dá)載體導(dǎo)入動(dòng)物受精卵常用顯微注射顯微注射技術(shù).
(2)由基因表達(dá)產(chǎn)物無(wú)法推知啟動(dòng)子堿基序列,其原因是基因中啟動(dòng)子的堿基序列不能被轉(zhuǎn)錄基因中啟動(dòng)子的堿基序列不能被轉(zhuǎn)錄.
(3)過(guò)程①需選擇的限制酶是BamHⅠBamHⅠ,過(guò)程③需選擇的限制酶是HindⅢHindⅢ.過(guò)程④需要使用的工具酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶).
(4)過(guò)程④中可以根據(jù)編碼序列兩端的部分堿基序列設(shè)計(jì)引物引物進(jìn)行擴(kuò)增.運(yùn)用PCR擴(kuò)增DNA片段的原理是DNA雙鏈復(fù)制DNA雙鏈復(fù)制.
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】乳腺蛋白基因;顯微注射;基因中啟動(dòng)子的堿基序列不能被轉(zhuǎn)錄;BamHⅠ;HindⅢ;熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶);引物;DNA雙鏈復(fù)制
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:45引用:3難度:0.9
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