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尖孢鐮刀菌會引起黃瓜枯萎病的發(fā)生。研究人員從土壤中分離篩選出對黃瓜枯萎病有抑制效果的拮抗細(xì)菌（jb9菌株），為黃瓜枯萎病提供生物防治。實驗過程如圖1所示，回答下列問題：
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（1）將土壤樣品制成懸浮液，步驟Ⅰ使用的接種方法是
平板劃線法
平板劃線法
，獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是
無菌操作
無菌操作
。培養(yǎng)基a必備的營養(yǎng)物質(zhì)有
碳源、氮源、水和無機(jī)鹽
碳源、氮源、水和無機(jī)鹽
。
（2）為驗證jb9菌株的抑菌效果，需要先將尖孢鐮刀菌均勻接種在培養(yǎng)基b表面，濾紙組作為對照組，用
無菌水
無菌水
處理濾紙。
（3）Jb9菌株能合成分泌真菌細(xì)胞壁降解酶（HCD），抑制尖孢鐮刀菌（真菌）的生長?？蒲腥藛T將獲取的HCD基因?qū)朦S瓜細(xì)胞，培育抗枯萎病的轉(zhuǎn)基因植株。圖2所示：含HCD基因的DNA片段、質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)及限制酶切割位點。
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①根據(jù)題意，將HCD基因與圖示的質(zhì)粒重組，應(yīng)選用的限制酶是
BamHⅠ和HindⅢ
BamHⅠ和HindⅢ
。在篩選培養(yǎng)基上，要加入
氨芐青霉素
氨芐青霉素
來篩選含有HCD基因的受體細(xì)胞。將受體細(xì)胞培育后獲得轉(zhuǎn)基因植株。
②檢測HCD基因是否成功表達(dá)出真菌細(xì)胞壁降解酶（HCD）的方法技術(shù)是
用尖孢鐮刀菌感染轉(zhuǎn)HCD基因的植株，觀察其抗病情況
用尖孢鐮刀菌感染轉(zhuǎn)HCD基因的植株，觀察其抗病情況
。

【答案】平板劃線法；無菌操作；碳源、氮源、水和無機(jī)鹽；無菌水；BamHⅠ和HindⅢ；氨芐青霉素；用尖孢鐮刀菌感染轉(zhuǎn)HCD基因的植株，觀察其抗病情況
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/10/31 8:0:1組卷：8引用：1難度：0.6
相似題

  • 1．近年來，過度依賴提高養(yǎng)殖密度和過量投餌的養(yǎng)殖方式，導(dǎo)致出現(xiàn)養(yǎng)殖環(huán)境生態(tài)失調(diào)、病害頻發(fā)、水資源浪費和污染嚴(yán)重等現(xiàn)象。益生菌能夠改善水質(zhì)，抑制有害菌的生長，保持微生態(tài)平衡，是水產(chǎn)動物防控病害的有效手段之一。研究人員從鯽魚腸道樣品中分離出具有抑菌效果的菌株，為開發(fā)適用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的抑菌類微生態(tài)制劑提供參考。抑菌效果用指示菌（嗜水氣單胞菌、哈維氏弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌等有害菌）進(jìn)行檢驗。用到LB液體培養(yǎng)基：蛋白胨1%、酵母膏0.5%、氯化鈉0.5%、水100mL。請回答下列問題：
    （1）LB液體培養(yǎng)基中的蛋白胨能為微生物提供
     
    ；用高壓蒸汽滅菌鍋對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時，水沸騰后，待
     
    ，再關(guān)閉排氣閥。
    （2）將樣品鯽魚腸道內(nèi)容物制成稀釋液，接種至LB液體培養(yǎng)基進(jìn)行富集培養(yǎng)，目的是
     
    ；將富集培養(yǎng)液加至LB固體培養(yǎng)基平板，涂布均勻，37℃恒溫培養(yǎng)。配制LB固體培養(yǎng)基時，通常需向LB液體培養(yǎng)基中加入
     
    ；菌落長出后，常采用
     
    法將其轉(zhuǎn)接種到新的平板上進(jìn)一步純化，得到初篩菌株。
    （3）采用打孔法測定初篩菌株的抑菌效果：吸取稀釋好的
     
    菌液0.6mL加入平板；使用2.7mm的直徑打孔器，在平板上垂直均勻打孔，標(biāo)記菌株編號，每孔分別注入10μL
     
    菌液，培養(yǎng)24h。每個樣品做3個平板。培養(yǎng)完畢，檢測板上出現(xiàn)抑菌圈，測量
     
    ，取平均值。
    （4）經(jīng)鑒定，菌株YJ4的抑菌效果最好，為進(jìn)一步驗證菌株YJ4的安全性，選擇健康鯽魚80尾，隨機(jī)均分為4組。實驗組分別采用腹腔注射法注射0.1mL濃度分別為1×109、1×108和1×107單位/mL的YJ4菌懸液，適宜條件下飼養(yǎng)7d,觀察并記錄實驗魚游動、攝食及死亡情況，最后剖檢，觀察有無病變，對照組的處理為
     
    。

    發(fā)布：2024/11/14 2:0:1組卷：7引用：2難度：0.7

  • 2．我國科學(xué)家發(fā)現(xiàn)“超級蠕蟲”——黃粉蟲（俗稱面包蟲）可以吃塑料，并從其腸道內(nèi)分離出了能夠降解聚苯乙烯（塑料的主要成分，縮寫PS）的細(xì)菌，為解決全球塑料污染問題打開了一扇新的大門。某科研小組計劃在實驗室分離純化能高效降解聚苯乙烯的細(xì)菌（目標(biāo)菌），然后獲取相關(guān)酶，以期實現(xiàn)塑料的生物酶降解。其基本思路如圖1：
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    Ⅰ號培養(yǎng)基：水、無機(jī)鹽、氮源、物質(zhì)X
    Ⅱ號培養(yǎng)基：水、無機(jī)鹽、氮源、物質(zhì)X、物質(zhì)Y
    （1）物質(zhì)X和物質(zhì)Y分別是
     
    和
     
    。
    （2）除了圖中所示方法外，還可以通過
     
    法在Ⅱ號培養(yǎng)基上純化降解PS塑料的微生物菌群，使其生長出單個菌落?？蒲腥藛T從中挑選了3株能穩(wěn)定降解PS塑料的菌種P1、P2和P3。
    （3）科研人員將紅色PS粉碎成粉末，均勻混合在無碳固體培養(yǎng)基中，之后再接種經(jīng)過稀釋的三種菌液，一段時間后可測得透明圈大?。―）與菌圈大?。╠）（如圖2所示）。若使用單一菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，應(yīng)選用P1菌種，理由是
     
    。
    （4）為測定PS降解酶降解塑料的能力，需要先將該酶分離出來，常用凝膠色譜法，凝膠色譜法分離PS降解酶的基本過程；樣品加入后進(jìn)行洗脫，而后收集PS降解酶。最后收集到的蛋白質(zhì)樣品與剛洗脫時收集到的蛋白質(zhì)相比，分子質(zhì)量較
     
    （填大或小），原因是
     
    。
    （5）分離得到PS降解酶后，為提高生產(chǎn)效率，需要對酶固定化，可以采用的方法有
     
    。

    發(fā)布：2024/11/13 23:0:1組卷：3引用：3難度：0.6

  • 3．安莎霉素是一類主要由海洋中的稀有放線菌產(chǎn)生的次級代謝產(chǎn)物，具有較高的抗菌活性和藥用價值。產(chǎn)安莎霉素的放線菌具有一個普遍的共性——氨基酸缺陷型（不能自身合成某些特定的氨基酸）?？蒲腥藛T從深海采集淤泥樣本，再分離、純化并篩選出產(chǎn)安莎霉素的放線菌，過程如圖所示。相關(guān)敘述錯誤的是（　　）
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    發(fā)布：2024/11/14 15:0:1組卷：29引用：3難度：0.5
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