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試題詳情
PCR技術廣泛用于對少量DNA樣品的大量擴增過程中,尤其在法醫(yī)鑒定中有重要的意義。PCR擴增過程示意圖如圖,請回答下列問題:
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(1)PCR技術的原理是DNA的半保留復制DNA的半保留復制。PCR反應中需要加入緩沖液、引物、模板DNA、四種脫氧核苷酸四種脫氧核苷酸、TaqDNA聚合酶TaqDNA聚合酶。
(2)圖中步驟1代表變性變性,步驟2代表復性復性,步驟3代表延伸,這三個步驟組成一輪循環(huán)。
(3)引物1和引物2的堿基序列不同不同(相同/不同)。若一個DNA分子在PCR中經(jīng)歷n輪循環(huán),理論上需要消耗2n+1-22n+1-2個引物,由引物形成子鏈的延伸方向是由5'→3'由5'→3'。
(4)PCR擴增時,退火溫度的設定是成敗的關鍵,退火溫度過高會破壞引物與模板引物與模板之間的堿基配對。退火溫度的設定與引物長度、堿基組成有關,長度相同但GC含量高的引物需要設定更高更高(更高/更低)的退火溫度。如果PCR反應得不到任何擴增產(chǎn)物,則可以采取的改進措施有②③②③(填序號:①升高退火溫度②降低退火溫度③重新設計引物)。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定.
【答案】DNA的半保留復制;四種脫氧核苷酸;TaqDNA聚合酶;變性;復性;不同;2n+1-2;由5'→3';引物與模板;更高;②③
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/5/23 20:38:36組卷:3引用:2難度:0.7
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