鐮孢菌引起的小麥赤霉病被稱為小麥“游癥”，是威脅糧食安全的重大國際性難題。我國科學(xué)家從小麥近緣屬植物長穗偃麥草中首次克隆出主效抗赤霉病基因Fhb7（編碼一種谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶），為解決小麥赤霉病的世界性難題提供了“金鑰匙”。研究發(fā)現(xiàn)，用光誘導(dǎo)型啟動子（PrbcS）能夠使Fhb7基因表達，其結(jié)合T基因后能使Fhb7基因更高水平表達。
（1）PrbcS是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，能被 RNA聚合酶RNA聚合酶識別并結(jié)合，驅(qū)動基因的持續(xù) 轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄。
（2）通過PCR技術(shù)擴增Fhb7基因片段，反應(yīng)過程一般由95℃熱變性、55～60℃引物和模板配對、72℃延伸三個步驟，經(jīng)過多次循環(huán)完成。延伸階段選用72℃綜合考慮了兩個因素，這兩個因素是 防止DNA變性防止DNA變性和 保持Taq酶活性所需溫度條件保持Taq酶活性所需溫度條件，若研究人員在反應(yīng)緩沖溶液中加入4種dNTP時，誤加入了單一種類的ddNTP（即2、3雙脫氧核苷三磷酸，在脫氧核糖的3位置缺少一個羧基），則子鏈會停止延伸，分析其原因是 3號碳上不是羥基，不能與下一個脫氧核苷酸的磷酸形成磷酸二酯鍵3號碳上不是羥基，不能與下一個脫氧核苷酸的磷酸形成磷酸二酯鍵。
（3）如圖中甲、乙均為Fhb7基因表達載體構(gòu)建過程中的中間載體，請分析重組載體的部分構(gòu)建過程。
（注：Kmr為卡那霉素抗性基因，origin為復(fù)制原點，其余為限制酶酶切位點）
區(qū)別含有中間載體甲-PrbcS-*T與含有重組載體乙-PrbcS-*T的微生物的方法是 用含有卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)用含有卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)。經(jīng)酶切后凝膠電泳，測得2B片段為0.3kb,經(jīng)圖示信息分析，PrbcS-T的長度約為 1.8kb1.8kb。據(jù)圖分析，形成重組載體乙-PrbcS-*T，需要使用限制酶 EcoRⅠEcoRⅠ切割，圖中重組載體乙-PrbcS-*T問號處有 EcoRⅠSphⅠ、BamHⅠ、EcoRⅠ、NotⅠ、XhoⅠ、EcoRⅤEcoRⅠSphⅠ、BamHⅠ、EcoRⅠ、NotⅠ、XhoⅠ、EcoRⅤ種限制酶的酶切位點。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】RNA聚合酶；轉(zhuǎn)錄；防止DNA變性；保持Taq酶活性所需溫度條件；3號碳上不是羥基，不能與下一個脫氧核苷酸的磷酸形成磷酸二酯鍵；用含有卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)；1.8kb；EcoRⅠ；EcoRⅠSphⅠ、BamHⅠ、EcoRⅠ、NotⅠ、XhoⅠ、EcoRⅤ
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：16引用：2難度：0.5
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ?。?img alt src="http://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：7引用：2難度：0.6 -
2．科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點突變技術(shù)改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點突變技術(shù)屬于（填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”）?？衫枚c突變的DNA構(gòu)建基因表達載體，常用將基因表達載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，還需用到植物細(xì)胞工程中的技術(shù)，才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
（2）PCR過程所依據(jù)的原理是。利用PCR技術(shù)擴增，若將一個目的基因復(fù)制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程稱為?？蒲腥藛T通過實驗研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中，經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因為這種細(xì)胞的全能性最容易表達
B．采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達
C．人的生長激素基因能在小鼠細(xì)胞表達，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進行核移植（克隆），可以獲得多個具有外源基因的后代發(fā)布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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