GFP是水母體內(nèi)存在的能發(fā)綠色熒光的一種蛋白??蒲腥藛T以GFP基因為材料,利用基因工程技術(shù)獲得了能發(fā)其他顏色熒光的蛋白,豐富了熒光蛋白的顏色種類。
(1)構(gòu)建目的基因表達載體??蒲腥藛T從構(gòu)建的GFP突變基因文庫中提取目的基因(均為突變基因)構(gòu)建表達載體,其模式圖如圖所示(箭頭為GFP突變基因的轉(zhuǎn)錄方向)。圖中①為 終止子終止子,②為 啟動子啟動子,其作用是 RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位,驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位,驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄;圖中氨芐青霉素抗性基因是一種標記基因,其作用是 鑒別受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來鑒別受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來。
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(2)目的基因的表達??蒲腥藛T將構(gòu)建好的表達載體導(dǎo)入大腸桿菌中進行表達,發(fā)現(xiàn)大腸桿菌有的發(fā)綠色熒光,有的發(fā)黃色熒光,有的不發(fā)熒光。請從密碼子特點的角度分析,發(fā)綠色熒光的可能原因是 密碼子具有簡并性密碼子具有簡并性(答出1點即可)。
(3)新蛋白與突變基因的關(guān)聯(lián)性分析。將上述發(fā)黃色熒光的大腸桿菌分離純化后,對其所含的GFP突變基因進行測序,發(fā)現(xiàn)其堿基序列與GFP基因的不同,將該GFP突變基因命名為YFP基因(黃色熒光蛋白基因)。若要通過基因工程的方法探究YFP基因能否在真核細胞中表達,實驗思路是 將構(gòu)建好的表達載體(含有目的基因YFP基因)導(dǎo)入酵母菌中進行表達將構(gòu)建好的表達載體(含有目的基因YFP基因)導(dǎo)入酵母菌中進行表達。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】終止子;啟動子;RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位,驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄;鑒別受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來;密碼子具有簡并性;將構(gòu)建好的表達載體(含有目的基因YFP基因)導(dǎo)入酵母菌中進行表達
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/7/30 8:0:9組卷:5引用:2難度:0.6
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1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>
A.DNA連接酶具有特異性,只能連接同一種限制性核酸內(nèi)切酶切割形成的黏性末端 B.若能在植物細胞中檢測到相應(yīng)的目的基因,則說明基因工程項目獲得成功 C.蛋白質(zhì)工程需構(gòu)建基因表達載體,改造后的蛋白質(zhì)的性狀可遺傳給后代 D.將抗蟲基因整合到某植物的線粒體DNA中,可通過花粉傳播,從而引起基因污染 發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7 -
2.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>
A.質(zhì)粒上標記基因的作用是便于重組DNA分子的篩選 B.目的基因必須整合到受體細胞的DNA中才能復(fù)制 C.構(gòu)建表達載體時需要在目的基因前加上起始密碼子 D.誘變育種和基因工程的原理相同 發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7 -
3.幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題:
(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括
(2)生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
(3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
(4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
(5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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