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GFP是水母體內(nèi)存在的能發(fā)綠色熒光的一種蛋白?？蒲腥藛T以GFP基因為材料，利用基因工程技術獲得了能發(fā)其他顏色熒光的蛋白，豐富了熒光蛋白的顏色種類。
（1）構建目的基因表達載體?？蒲腥藛T從構建的GFP突變基因文庫中提取目的基因（均為突變基因）構建表達載體，其模式圖如圖所示（箭頭為GFP突變基因的轉(zhuǎn)錄方向）。圖中①為
終止子
終止子
，②為
啟動子
啟動子
，其作用是
RNA聚合酶識別和結合的部位，驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄
RNA聚合酶識別和結合的部位，驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄
；圖中氨芐青霉素抗性基因是一種標記基因，其作用是
鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來
鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來
。
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（2）目的基因的表達?？蒲腥藛T將構建好的表達載體導入大腸桿菌中進行表達，發(fā)現(xiàn)大腸桿菌有的發(fā)綠色熒光，有的發(fā)黃色熒光，有的不發(fā)熒光。請從密碼子特點的角度分析，發(fā)綠色熒光的可能原因是
密碼子具有簡并性
密碼子具有簡并性
（答出1點即可）。
（3）新蛋白與突變基因的關聯(lián)性分析。將上述發(fā)黃色熒光的大腸桿菌分離純化后，對其所含的GFP突變基因進行測序，發(fā)現(xiàn)其堿基序列與GFP基因的不同，將該GFP突變基因命名為YFP基因（黃色熒光蛋白基因）。若要通過基因工程的方法探究YFP基因能否在真核細胞中表達，實驗思路是
將構建好的表達載體（含有目的基因YFP基因）導入酵母菌中進行表達
將構建好的表達載體（含有目的基因YFP基因）導入酵母菌中進行表達
。

【答案】終止子；啟動子；RNA聚合酶識別和結合的部位，驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄；鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來；密碼子具有簡并性；將構建好的表達載體（含有目的基因YFP基因）導入酵母菌中進行表達
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/7/30 8:0:9組卷：5引用：2難度：0.6
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  • 菁優(yōu)網(wǎng)1．限制酶a、限制酶b能將某線性DNA分子片段切割，其識別序列和切割位點如圖所示。下列敘述錯誤的是（　?。?/h2>

    發(fā)布：2024/11/10 15:30:3組卷：21引用：5難度：0.7

  • 2．中國甜柿的自然脫澀與乙醛代謝關鍵酶基因（PDC）密切相關，推測澀味程度可能與PDC基因的表達情況有關。
    （1）啟動子位于基因首端，是RNA聚合酶識別和結合的位點，同時啟動子區(qū)域還存在著許多調(diào)控蛋白的結合位點，RNA聚合酶和調(diào)控蛋白共同影響了基因的
     
    。
    （2）為篩選PDC基因的調(diào)控蛋白，科研人員進行了下列實驗。
    ①PDC基因的啟動子序列未知，為獲得大量該基因啟動子所在片段，可利用限制酶將基因組DNA進行酶切，然后在
     
    的作用下將已知序列信息的接頭片段連接在PDC基因的上游，根據(jù)
     
    和PDC基因編碼序列設計引物進行PCR.利用質(zhì)粒A（圖1）構建含有PDC基因啟動子片段的重組質(zhì)粒并導入代謝缺陷型酵母菌，用不含
     
    的培養(yǎng)基可篩選出成功轉(zhuǎn)化的酵母菌Y1H。
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    ②質(zhì)粒G（圖2）上的AD基因表達出的AD蛋白與啟動子足夠靠近時，能夠激活后續(xù)基因轉(zhuǎn)錄，因此需獲得待測蛋白與AD蛋白的融合蛋白用于后續(xù)篩選。科研人員從中國甜柿中提取RNA，將逆轉(zhuǎn)錄形成的各種cDNA與質(zhì)粒G連接后導入酵母菌，此時應選擇質(zhì)粒G中的位點
     
    （填序號1～5）作為cDNA的插入位點，最終獲得攜帶不同cDNA片段的酵母菌群Y187。
    ③重組酵母Y187與Y1H能夠進行接合生殖，形成的接合子含有兩種酵母菌質(zhì)粒上的所有基因。若接合子能在含有金擔子素的培養(yǎng)基中生存，則推測待測蛋白是PDC基因的調(diào)控蛋白，請結合圖示闡述作出該推測的理由。

    發(fā)布：2024/11/11 0:0:2組卷：82引用：2難度：0.7

  • 3．某一質(zhì)粒載體如圖甲所示，Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Tett表示四環(huán)素抗性基因。有人將此質(zhì)粒載體用BamHⅠ酶切后，與用BamHⅠ酶切獲得的目的基因混合，加入DNA連接酶進行連接反應，用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化后得到多種大腸桿菌，并利用培養(yǎng)基乙和丙篩選出導入重組質(zhì)粒的大腸桿菌。下列敘述錯誤的是（　　）
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    發(fā)布：2024/11/10 9:0:1組卷：59引用：4難度：0.6
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