黃曲霉毒素主要是由黃曲霉和寄生曲霉等多種真菌產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物，包括AFB1、AFB2、AFG1等多種衍生物。黃曲霉毒素的毒性強(qiáng)，具有抑制免疫、誘導(dǎo)突變和致癌的作用，香豆素是黃曲霉毒素的結(jié)構(gòu)類似物。黃曲霉毒素的生物去除法是利用微生物分泌的酶降解黃曲霉毒素，產(chǎn)生低毒或無毒的降解產(chǎn)物。研究人員為篩選高效降解黃曲霉毒素的菌株，開展了相關(guān)的研究?；卮鹣铝袉栴}：
（1）配制的富集培養(yǎng)基和初篩平板培養(yǎng)基，常用
高壓蒸汽滅菌
高壓蒸汽滅菌
法進(jìn)行滅菌。富集培養(yǎng)基的成分：香豆素0.1%、（NH4）2SO40.5%、NaCl0.85%、pH7.0；初篩平板培養(yǎng)基的成分：香豆素0.1%、（NH4）2SO40.5%、KH2PO40.25%、MgSO40.1%、Na2HPO4?12H2O 0.05%、CaCl2 0.01%、瓊脂2%、pH6.5。香豆素可用于篩選目的菌的原因是 香豆素的化學(xué)結(jié)構(gòu)與黃曲霉毒素的類似，作為唯一碳源可使目的菌能夠生長而其他微生物生長受到抑制
香豆素的化學(xué)結(jié)構(gòu)與黃曲霉毒素的類似，作為唯一碳源可使目的菌能夠生長而其他微生物生長受到抑制
。初篩平板培養(yǎng)基中無機(jī)物的主要作用是 提供無機(jī)鹽和維持培養(yǎng)基的pH穩(wěn)定
提供無機(jī)鹽和維持培養(yǎng)基的pH穩(wěn)定
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（2）從霉?fàn)€的花生殼、動(dòng)物糞便中取樣，稀釋后將菌懸液加入到富集培養(yǎng)基中，適宜條件下富集培養(yǎng)三次。將富集培養(yǎng)的菌液用 平板劃線法或稀釋涂布平板
平板劃線法或稀釋涂布平板
法接種到初篩平板培養(yǎng)基上，適宜條件下培養(yǎng)后，挑選 單個(gè)菌落直徑較大
單個(gè)菌落直徑較大
的菌體進(jìn)行純化培養(yǎng)。
（3）經(jīng)多輪篩選后獲得H菌株。搖瓶培養(yǎng)H菌株一段時(shí)間后取5mL發(fā)酵液進(jìn)行離心，取950μL離心上清液加入5μL一定濃度的AFB1液，控制AFB，的終濃度1μg/mL。反應(yīng)24h后經(jīng)萃取、溶解、過濾后檢測(cè)殘余AFB1的含量。該實(shí)驗(yàn)還需要在 滅菌的發(fā)酵離心上清液
滅菌的發(fā)酵離心上清液
中加入等量的AFB1液作為空白對(duì)照。該步驟用于檢測(cè) H菌株分泌的黃曲霉毒素降解酶的活力
H菌株分泌的黃曲霉毒素降解酶的活力
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