研究發(fā)現(xiàn)物質(zhì)X與肝細(xì)胞膜上Y蛋白結(jié)合可促進(jìn)某動物肝臟細(xì)胞的增殖,請設(shè)計相應(yīng)的實(shí)驗方案驗證該發(fā)現(xiàn)。
實(shí)驗材料與用具:正常肝臟細(xì)胞、Y蛋白基因敲除的肝臟細(xì)胞(Y蛋白基因敲除的肝臟細(xì)胞增殖能力有所降低)、X物質(zhì)溶液、培養(yǎng)液、比濁計及其他實(shí)驗所需試劑、材料和用具。
(說明:答題時不考慮加入X后的體積變化等誤差,X與Y蛋白不結(jié)合時對細(xì)胞無影響。提供的細(xì)胞均具有分裂能力,只進(jìn)行原代培養(yǎng)且培養(yǎng)條件適宜,比濁計使用方法不做要求)
(1)實(shí)驗思路:
①取培養(yǎng)瓶若干個,分組并編號如下:
A、C組:等量的細(xì)胞培養(yǎng)液+正常肝臟細(xì)胞;
B、D組:等量的細(xì)胞培養(yǎng)液+Y蛋白基因敲除的肝臟細(xì)胞。
每組設(shè)置若干個重復(fù)樣品。培養(yǎng)12小時后,在A、B兩組中分別加入 等量的物質(zhì)X等量的物質(zhì)X。
②各組樣品在 CO2培養(yǎng)箱CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),每隔6小時各取其中的幾個樣品,用比濁計測定渾濁度并記錄數(shù)據(jù)用比濁計測定渾濁度并記錄數(shù)據(jù)。由于動物細(xì)胞培養(yǎng)時 貼壁生長貼壁生長難以形成細(xì)胞懸液,所以需加入胰蛋白酶并搖勻后再測定。
③24小時后結(jié)束實(shí)驗統(tǒng)計分析數(shù)據(jù),并以此數(shù)據(jù)為縱坐標(biāo)繪制曲線。
(2)請用曲線圖預(yù)測實(shí)驗結(jié)果。
(3)分析與討論:
a.物質(zhì)X能與Y蛋白特異性結(jié)合,與Y蛋白的 空間結(jié)構(gòu)/構(gòu)象空間結(jié)構(gòu)/構(gòu)象有關(guān)。
b.本實(shí)驗的檢測指標(biāo)能反映細(xì)胞增殖情況的依據(jù)是 一定范圍內(nèi),細(xì)胞數(shù)目與渾濁度呈正相關(guān)/細(xì)胞數(shù)目越多,對光的吸收越多,渾濁度越大一定范圍內(nèi),細(xì)胞數(shù)目與渾濁度呈正相關(guān)/細(xì)胞數(shù)目越多,對光的吸收越多,渾濁度越大,也可用 血細(xì)胞計數(shù)板/血細(xì)胞計數(shù)法血細(xì)胞計數(shù)板/血細(xì)胞計數(shù)法進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
【考點(diǎn)】動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件與過程.
【答案】等量的物質(zhì)X;CO2培養(yǎng)箱;用比濁計測定渾濁度并記錄數(shù)據(jù);貼壁生長;空間結(jié)構(gòu)/構(gòu)象;一定范圍內(nèi),細(xì)胞數(shù)目與渾濁度呈正相關(guān)/細(xì)胞數(shù)目越多,對光的吸收越多,渾濁度越大;血細(xì)胞計數(shù)板/血細(xì)胞計數(shù)法
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:10引用:1難度:0.6
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