人類乳頭瘤病毒（HPV）有多種亞型，HPV45屬于高危型，與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)。L1蛋白是組成HPV病毒衣殼的主要結(jié)構(gòu)蛋白，科研人員進行了HPV45的抗L1蛋白單克隆抗體的制備與研究?；卮鹣铝袉栴}：
（1）提取HPV45的L1蛋白，注射到小鼠體內(nèi)，其目的是

誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生能夠分泌抗L1蛋白抗體的B淋巴細(xì)胞

誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生能夠分泌抗L1蛋白抗體的B淋巴細(xì)胞

。一段時間后，取小鼠脾臟組織，剪碎用

胰蛋白/膠原蛋白酶

胰蛋白/膠原蛋白酶

酶處理，使其分散成單個細(xì)胞制成細(xì)胞懸液，與小鼠骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合，篩選出雜交瘤細(xì)胞。
（2）將得到的雜交瘤細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板進行

克隆化

克隆化

培養(yǎng)，分別取其上清液進行

抗體陽性/抗體

抗體陽性/抗體

檢測，檢測的原理及操作流程如圖1。經(jīng)多次篩選后，取A、B、C、D四種雜交瘤細(xì)胞上清液進行檢測，結(jié)果如圖2。

①據(jù)圖分析，實驗過程中需將

L1蛋白

L1蛋白

作為抗原固定在固相載體上，分別取

不同稀釋倍數(shù)（濃度）的4種雜交瘤細(xì)胞上清液和未免疫小鼠血清

不同稀釋倍數(shù)（濃度）的4種雜交瘤細(xì)胞上清液和未免疫小鼠血清

加入反應(yīng)體系，經(jīng)洗滌后加入酶標(biāo)抗體形成復(fù)合物，再次洗滌，加入相應(yīng)底物，復(fù)合物攜帶的酶可與相應(yīng)底物反應(yīng)顯色，測吸光值，顏色越深吸光值越高。
②圖2結(jié)果表明

四種雜交瘤細(xì)胞上清液均含有能與L1蛋白結(jié)合的抗體，且上清液A中抗體與L1蛋白結(jié)合能力最強

四種雜交瘤細(xì)胞上清液均含有能與L1蛋白結(jié)合的抗體，且上清液A中抗體與L1蛋白結(jié)合能力最強

。
③依據(jù)圖2結(jié)果，研究人員推測A、B、C、D四種上清液中，A上清液的抗體與L1蛋白結(jié)合的位點是HPV45型病毒識別并侵染人體細(xì)胞的關(guān)鍵位點。為探究此推測，進行實驗，
實驗步驟如下：
步驟一：將小鼠宮頸細(xì)胞懸液均分為四組，編號甲、乙、丙、丁；
步驟二：從稀釋倍數(shù)為1：320的A、B、C、D（雜交瘤細(xì)胞）上清液中分離提純抗體，

分別與HPV45型病毒混合，再加入到小鼠宮頸細(xì)胞懸液甲、乙、丙、丁中

分別與HPV45型病毒混合，再加入到小鼠宮頸細(xì)胞懸液甲、乙、丙、丁中

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步驟三：在相同且適宜的條件下培養(yǎng)一段時間，檢測培養(yǎng)液中被侵染的宮頸細(xì)胞比例。實驗預(yù)期結(jié)果與結(jié)論：若

甲組中被侵染的宮頸細(xì)胞比例最高/甲組中被侵染的宮頸細(xì)胞比例高于其他組

甲組中被侵染的宮頸細(xì)胞比例最高/甲組中被侵染的宮頸細(xì)胞比例高于其他組

，則推測正確。
（3）科研人員制備HPV45的抗L1蛋白單克隆抗體，在醫(yī)學(xué)方面的應(yīng)用有

用于HPV45病毒感染的診斷、治療、運載藥物（或診斷試劑、治療疾病、運載藥物）

用于HPV45病毒感染的診斷、治療、運載藥物（或診斷試劑、治療疾病、運載藥物）

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