鐮孢菌引起的小麥赤霉病被稱為小麥“游癥”，是威脅糧食安全的重大國(guó)際性難題。我國(guó)科學(xué)家從小麥近緣屬植物長(zhǎng)穗偃麥草中首次克隆出主效抗赤霉病基因Fhb7（編碼一種谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶），為解決小麥赤霉病的世界性難題提供了“金鑰匙”。研究發(fā)現(xiàn)，用光誘導(dǎo)型啟動(dòng)子（PrbcS）能夠使Fhb7基因表達(dá)，其結(jié)合T基因后能使Fhb7基因更高水平表達(dá)。
（1）PrbcS是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，能被 RNA聚合酶RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合，驅(qū)動(dòng)基因的持續(xù) 轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄過(guò)程。
（2）通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增Fhb7基因片段，反應(yīng)過(guò)程一般由95℃熱變性、55～60℃引物和模板配對(duì)、72℃延伸三個(gè)步驟，經(jīng)過(guò)多次循環(huán)完成。延伸階段選用72℃而非95℃綜合考慮了兩個(gè)因素，這兩個(gè)因素是 防止DNA變性防止DNA變性和 保持Taq酶活性所需溫度條件保持Taq酶活性所需溫度條件。
（3）圖中甲、乙均為Fhb7基因表達(dá)載體構(gòu)建過(guò)程中的中間載體，請(qǐng)分析重組載體丙的部分構(gòu)建過(guò)程。區(qū)別含有中間載體甲與含有重組載體丙的微生物的方法是 用含有卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)用含有卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)。經(jīng)酶切后凝膠電泳，測(cè)得含2B基因片段長(zhǎng)度為0.3kb,經(jīng)圖示信息分析，含光誘導(dǎo)型啟動(dòng)子-T基因的片段長(zhǎng)度約為 1.8kb1.8kb。據(jù)圖分析，形成重組載體丙，需要使用限制酶 HindШ和NotⅠHindШ和NotⅠ切割中間載體甲和乙，圖中重組載體丙問(wèn)號(hào)處有 66種限制酶的酶切位點(diǎn)。
（注：圖中單詞代表限制酶酶切位點(diǎn)）
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】RNA聚合酶；轉(zhuǎn)錄；防止DNA變性；保持Taq酶活性所需溫度條件；用含有卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)；1.8kb；HindШ和NotⅠ；6
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：29引用：2難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得。基因文庫(kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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