大腸桿菌是人和許多動物腸道中最主要且數(shù)量最多的一類細菌,含有2000種以上的蛋白質(zhì);大腸桿菌的數(shù)量是檢測自來水是否受糞便污染的最直接的指標。
回答下列問題:
(1)利用凝膠色譜法分離提取到的部分大腸桿菌蛋白質(zhì)時,等樣品完全進入凝膠層后,加入pH為7.0、濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液磷酸緩沖液到適當高度進行洗脫,結(jié)果甲蛋白質(zhì)先洗脫出來,乙蛋白質(zhì)后洗脫出來,則相對分子質(zhì)量較大的是甲甲蛋白質(zhì)。
(2)通過濾膜法可以測定自來水中大腸桿菌的數(shù)目:一定體積的自來水樣過濾后,將濾膜放在伊紅-美藍培養(yǎng)基(主要成分包括:蛋白胨、NaCl、瓊脂、乳糖、伊紅和美藍水溶液)上培養(yǎng),大腸桿菌的代謝產(chǎn)物能與伊紅-美藍反應,使菌落呈黑色。根據(jù)培養(yǎng)基上菌落的數(shù)目,計算出大腸桿菌的數(shù)量。
①伊紅-美藍培養(yǎng)基屬于鑒別鑒別(填“選擇”或“鑒別”)培養(yǎng)基,蛋白胨的作用有提供碳源、氮源、維生素提供碳源、氮源、維生素(答出兩點即可)。
②培養(yǎng)大腸桿菌時,在接種前通常需要檢測固體培養(yǎng)基是否被污染,檢測方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的條件下放置一段時間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落出現(xiàn)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的條件下放置一段時間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落出現(xiàn)。
③用濾膜法進行測定時,濾膜的孔徑應小于小于(填“大于”或“小于”)大腸桿菌。濾膜法是根據(jù)培養(yǎng)基上菌落的數(shù)目來推測樣品中的活菌數(shù),其原理是培養(yǎng)基表現(xiàn)生長的一個菌落來源于樣品中的一個活菌培養(yǎng)基表現(xiàn)生長的一個菌落來源于樣品中的一個活菌。
【考點】微生物的數(shù)量測定.
【答案】磷酸緩沖液;甲;鑒別;提供碳源、氮源、維生素;將未接種的培養(yǎng)基在適宜的條件下放置一段時間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落出現(xiàn);小于;培養(yǎng)基表現(xiàn)生長的一個菌落來源于樣品中的一個活菌
【解答】
【點評】
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