三氯生是一種抑菌物質，具有優(yōu)異的貯存穩(wěn)定性，可以替代抗生素用于基因工程中篩選含目的基因的受體細胞。已知fabV（從霍亂弧菌中發(fā)現的烯脂酰ACP還原酶）基因可以使大腸桿菌抵抗三氯生。

（1）通過PCR方法獲取fabV基因時，Taq酶只能從
引物的3′端
引物的3′端
延伸DNA鏈，而不能從頭開始合成DNA，因此需要先根據
目的基因fabV基因兩端堿基序列
目的基因fabV基因兩端堿基序列
設計兩種特異性引物序列。反應體系的初始溫度設置在90～95℃的目的是
使fabV基因受熱變性后解為單鏈
使fabV基因受熱變性后解為單鏈
。
（2）在④步驟中，科研者需將大腸桿菌菌液利用
稀釋涂布平板
稀釋涂布平板
法接種到加有
三氯生
三氯生
的細菌培養(yǎng)基上，待菌落長成后，直接挑取菌落加入到PCR反應系統中進行基因鑒定。PCR過程中不需要先提取細菌DNA的原因是
大腸桿菌屬于原核生物，其DNA是裸露的，可以直接作為PCR模板，且PCR變性階段的高溫可直接殺死細菌，使其釋放DNA
大腸桿菌屬于原核生物，其DNA是裸露的，可以直接作為PCR模板，且PCR變性階段的高溫可直接殺死細菌，使其釋放DNA
。
（3）某科研團隊將可以受溫度調控的基因插入上述選出的重組質粒中，構建了溫度調控表達質粒（如圖2）。其中C基因在低溫下會抑制P₁，R基因在高溫下會抑制P₂。如果將lacZ基因和GFP基因插入圖2質粒中，使得最后表現為低溫下只表達GFP蛋白，而高溫下只表達lacz蛋白。則lacZ基因插在
P₁→T₁
P₁→T₁
之間，GFP基因插在
P₂→T₂
P₂→T₂
之間。

【答案】引物的3′端；目的基因fabV基因兩端堿基序列；使fabV基因受熱變性后解為單鏈；稀釋涂布平板；三氯生；大腸桿菌屬于原核生物，其DNA是裸露的，可以直接作為PCR模板，且PCR變性階段的高溫可直接殺死細菌，使其釋放DNA；P₁→T₁；P₂→T₂

【解答】

【點評】

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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：33引用：3難度：0.5

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1．循環(huán)閾值（Ct值）是通過一定的技術手段，使病毒的擴增產物達到可檢測水平所需的循環(huán)次數。新冠肺炎診療方案（第九版）把感染者出院標準規(guī)定為兩次核酸檢測Ct值均＞35。下列說法錯誤的是（　?。?/h2>

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發(fā)布：2024/11/13 7:30:1組卷：10引用：4難度：0.7

A．該實驗中所用的P1、P2、P3三種引物均為單鏈DNA

B．R基因被T-DNA插入后導致基因突變，可能無法表達相應蛋白

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發(fā)布：2024/11/15 2:30:2組卷：51引用：3難度：0.7

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發(fā)布：2024/11/15 12:0:1組卷：14引用：4難度：0.7

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