閱讀以下資料，回答（1）-（6）題。
資料一：S蛋白是新冠病毒（SARS-CoV-2）感染機體的關(guān)鍵組分，也是研制新冠疫苗的關(guān)鍵起點。2021年2月25日，由中國工程院院士陳薇領(lǐng)銜研發(fā)的以腺病毒為載體的疫苗獲準上市注冊申請，為我國乃至世界預防新冠疫情又增加了一件利器。如圖為陳薇團隊以缺失E，等基因的人復制缺陷腺病毒（E，基因是腺病毒基因組復制的關(guān)鍵基因）為載體的新冠疫苗研制流程示意圖甲。
（1）HEK細胞是一種特殊的人胚胎腎源細胞，在該細胞中，質(zhì)粒I和質(zhì)粒Ⅱ可在相關(guān)酶的作用下進行同源重組，形成含S蛋白基因的復制缺陷重組腺病毒。為保證上述重組腺病毒能夠大量復制，HEK細胞應(yīng)含有E1E1基因及其表達產(chǎn)物。對獲得的重組腺病毒除用PCR檢測s蛋白基因外，還需用抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交的方法檢測S蛋白。
（2）與復制型腺病毒相比，利用復制缺陷腺病毒為載體制備成的疫苗的優(yōu)點是該疫苗不能在人體細胞中復制，因而具有更高的安全性該疫苗不能在人體細胞中復制，因而具有更高的安全性。
資料二：疫苗從研制走向臨床使用，需經(jīng)動物實驗和臨床實驗等多重檢測，以保證其安全性和有效性。陳薇團隊對上述復制缺陷重組腺病毒疫苗的特異性免疫反應(yīng)及其保護效果進行評價。圖1、2表示不同的接種劑量和接種方式對小鼠免疫的影響，圖3表示接種不同劑量疫苗，14天后接種新冠病毒，72小時后檢測小鼠肺組織的病毒含量。
（3）IFNy是一種能增強效應(yīng)T細胞活力的淋巴因子，在免疫系統(tǒng)組成中，它與抗體均屬于免疫活性物質(zhì)免疫活性物質(zhì)。由圖1、圖2結(jié)果可知，該疫苗可誘導小鼠產(chǎn)生明顯的細胞和體液細胞和體液免疫。
（4）圖3實驗中對照組的處理為注射等量的不含疫苗的生理鹽水，14 天后接種等量新冠病毒注射等量的不含疫苗的生理鹽水，14 天后接種等量新冠病毒，結(jié)果顯示疫苗對感染小鼠有明顯的保護作用。為了達到最大的保護效果，該疫苗最適合的接種方式和劑量為肌肉注射、高劑量肌肉注射、高劑量。
（5）有人認為，最近出現(xiàn)的變異新冠病毒有可能使該疫苗失去保護作用。你是否贊同他的觀點？請說明理由贊同，理由是：若變異病毒的s蛋白基因發(fā)生突變，表達出的S蛋白與疫苗的S蛋白結(jié)構(gòu)差異過大，會導致人體注射疫苗后產(chǎn)生的抗體或記憶細胞無法識別新病毒，故疫苗失去保護作用（不贊同，理由是：若變異病毒發(fā)生突變后表達出的S蛋白與疫苗的s蛋白結(jié)構(gòu)差異不大，人體注射疫苗后產(chǎn)生的抗體或記憶細胞仍能識別并清除該病毒，疫苗仍有保護作用）贊同，理由是：若變異病毒的s蛋白基因發(fā)生突變，表達出的S蛋白與疫苗的S蛋白結(jié)構(gòu)差異過大，會導致人體注射疫苗后產(chǎn)生的抗體或記憶細胞無法識別新病毒，故疫苗失去保護作用（不贊同，理由是：若變異病毒發(fā)生突變后表達出的S蛋白與疫苗的s蛋白結(jié)構(gòu)差異不大，人體注射疫苗后產(chǎn)生的抗體或記憶細胞仍能識別并清除該病毒，疫苗仍有保護作用）。
【答案】E1；抗原-抗體雜交；該疫苗不能在人體細胞中復制，因而具有更高的安全性；免疫活性物質(zhì)；細胞和體液；注射等量的不含疫苗的生理鹽水，14 天后接種等量新冠病毒；肌肉注射、高劑量；贊同，理由是：若變異病毒的s蛋白基因發(fā)生突變，表達出的S蛋白與疫苗的S蛋白結(jié)構(gòu)差異過大，會導致人體注射疫苗后產(chǎn)生的抗體或記憶細胞無法識別新病毒，故疫苗失去保護作用（不贊同，理由是：若變異病毒發(fā)生突變后表達出的S蛋白與疫苗的s蛋白結(jié)構(gòu)差異不大，人體注射疫苗后產(chǎn)生的抗體或記憶細胞仍能識別并清除該病毒，疫苗仍有保護作用）
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：31引用：1難度：0.6
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1．學習以下材料，回答（1）～（4）題。
利用抑制性tRNA進行無義突變遺傳病的治療
無義突變是由于某個堿基的改變使代表某種氨基酸的密碼子突變?yōu)榻K止密碼子（UAA、UAG或UGA），從而使肽鏈合成提前終止，造成蛋白質(zhì)的功能改變，引發(fā)相關(guān)疾病。約有10%～15%的人類基因相關(guān)遺傳疾病是由無義突變引發(fā)的。常規(guī)的基因治療是將正?；虻腸DNA序列或是有治療價值的基因（如CRISPR-Cas9相關(guān)的基因編輯工具）通過一定的方式導入人體靶細胞內(nèi)，達到替代或修復缺陷基因、治療疾病的目的。導入基因插入位置不當、過高或過低表達，都可能會導致副作用。盡管基因編輯可以實現(xiàn)生理水平的基因表達，但基因編輯工具引入外源蛋白可能引發(fā)強烈的免疫反應(yīng)仍然是巨大的挑戰(zhàn)。
抑制性tRNA（sup-tRNA）由天然tRNA改造而來，它的反密碼子通過堿基配對原則可以識別無義突變的終止密碼子，使得mRNA在翻譯至無義突變位點時不啟動翻譯終止而是繼續(xù)向后進行翻譯，獲得有功能的全長蛋白。
I型黏多糖貯積癥的病因，是相關(guān)基因發(fā)生無義突變，產(chǎn)生終止密碼子UAG。研究者構(gòu)建小鼠該突變基因mldua和Flag基因融合的載體（圖1），以及針對該無義突變設(shè)計的sup-tRNA表達載體（產(chǎn)生的sup-tRNA能夠識別UAG并攜帶酪氨酸Tyr,簡寫作sup-tRNATyr），將其導入細胞進行研究，發(fā)現(xiàn)與具有相似作用的化合物G418比較，sup--tRNA的作用更加顯著（圖2）；進一步利用重組腺相關(guān)病毒作為載體將sup-tRNA導入患病小鼠模型中，實驗顯示能夠降低黏多糖過度積存，實現(xiàn)對該病癥的有效治療，其療效可以持續(xù)半年以上。
從整體來看，G418在促進跨越無義突變位點繼續(xù)翻譯時引入的氨基酸較為隨機，而sup-tRNA引入的氨基酸較為單一，且不會影響內(nèi)源tRNA穩(wěn)態(tài)，所以sup-tRNA在個體治療中具有很高的安全性，因而在未來基因突變引起的疾病相關(guān)治療中具有非常大的應(yīng)用前景。
（1）侵染時，作為載體的重組腺相關(guān)病毒與靶細胞膜上的發(fā)生識別，引發(fā)內(nèi)吞，進入細胞后釋放單鏈DNA作為模板，利用宿主細胞的催化合成其互補DNA鏈，再經(jīng)過過程產(chǎn)生sup-tRNA。
（2）除了引入的氨基酸較為單一，不影響內(nèi)源tRNA穩(wěn)態(tài)，我們還可推斷，用于治療的sup-tRNA在正常終止密碼子處（填“能”或“不能”）繼續(xù)往后翻譯，具有很高的安全性。
（3）研究者構(gòu)建mldua突變基因和Flag基因融合的載體，目的是通過檢測來確定是否跨越無義突變位點繼續(xù)向后翻譯。實驗結(jié)果表明，相比于化合物G418，sup-tRNA在促進無義突變位點的翻譯方面更加有效，支持這一結(jié)論的依據(jù)是：。
（4）有文獻報道，已在近1000個不同的人類基因中發(fā)現(xiàn)了7500多個無義突變。常規(guī)的基因治療需要為每種疾病設(shè)計獨特的治療策略，這將是一項耗費驚人的項目。據(jù)此說明sup-tRNA的應(yīng)用價值。發(fā)布：2025/1/3 8:0:1組卷：27引用：1難度：0.6 -
2．人類基因組計劃測定了人體的24條染色體，這24條染色體是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 0:30:1組卷：112引用：7難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，自然界有些植物能產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶催化幾丁質(zhì)水解從而抵抗真菌感染。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入沒有抗性的植物體內(nèi)，可增強其抗真菌的能力。如圖表示為獲取幾丁質(zhì)酶基因而建立cDNA文庫的過程。
（1）圖示以mRNA為材料通過法獲得cDNA，該方法依據(jù)的原理是，通過這種方法獲得的基因中因缺乏和結(jié)構(gòu)，導致將其直接導入受體細胞中不能復制和表達。
（2）與選用老葉相比，選用嫩葉更容易提取到mRNA，原因是，且提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（3）將從cDNA文庫中獲得的幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體用酶和DNA連接處理后連接起來，構(gòu)建基因表達載體，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：5引用：1難度：0.7
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