科研人員利用胚胎干細胞(ES細胞)對干擾素基因缺失小鼠進行基因治療。其技術(shù)流程如圖一:
(1)步驟①中,在核移植前應去除卵母細胞的細胞核細胞核,供核的細胞通常選用傳代10代以內(nèi)的細胞,其原因是十代以內(nèi)的細胞能保持正常的二倍體核型十代以內(nèi)的細胞能保持正常的二倍體核型。
(2)獲取ES細胞的來源有早期胚胎或原始性腺早期胚胎或原始性腺。
(3)步驟③中,需要構(gòu)建含有干擾素基因的基因表達載體基因表達載體。構(gòu)建前利用PCR技術(shù)擴增干擾素基因時,可以從如圖二A、B、C、D四種單鏈DNA片段中選取B和CB和C作為引物。對干擾素基因片段和質(zhì)粒進行酶切時,可選用限制酶的組合為HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠHindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ。
(4)將步驟③獲得的ES細胞在熒光顯微鏡下觀察,選擇發(fā)綠綠色熒光的細胞進行體外誘導。為檢測干擾素基因是否表達,可以采用抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交的方法。
(5)科學家正在通過蛋白質(zhì)工程技術(shù)將干擾素分子中的一個半胱氨酸變成絲氨酸,就可以在不影響其活性的前提下延長其保存周期。這項技術(shù)是以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系為基礎(chǔ)而進行的操作。
【考點】干細胞的培養(yǎng)及其應用.
【答案】細胞核;十代以內(nèi)的細胞能保持正常的二倍體核型;早期胚胎或原始性腺;基因表達載體;B和C;HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ;綠;抗原-抗體雜交;蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:6引用:3難度:0.7
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