為使甘藍具有抗除草劑能力，科研人員將除草劑草甘膦抗性基因轉入甘藍植株，獲得抗草甘膦轉基因甘藍。
（1）草甘膦抗性基因一條鏈的兩端序列如圖2，采用PCR技術獲取和擴增草甘膦抗性基因，應選用的引物組合為 AA。
A．5′-CTTGGATGAT-3′和5′-TCTGTTGAAT-3′
B．5′-CTTGGATGAT-3′和5′-TAAGTTGTCT-3′
C．5′-ATTCAACAGA-3′和5′-ATCATCCAAG-3′
D．5′-ATTCAACAGA-3′和5′-GAACCTACTA-3′
（2）基因工程中最核心的步驟是 ①①（填數字編號），其目的是 使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并可以遺傳給下一代，同時使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并可以遺傳給下一代，同時使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。
（3）步驟②用 Ca2+Ca2+處理農桿菌后獲得感受態(tài)細胞，以便將重組質粒導入。步驟③將農桿菌與甘藍愈傷組織共培養(yǎng)后，在步驟④的培養(yǎng)基中添加 潮霉素潮霉素以便篩選出含目的基因的甘藍植株。
（4）若目的基因用BamHⅠ和BglⅡ剪切，質粒用BamHⅠ剪切，酶切后的目的基因存在正向與反向兩種連接方式，可用 BamHI和EcoRIBamHI和EcoRI酶對兩種重組質粒進行剪切，通過凝膠電泳分析產物大小進行區(qū)分，如圖3所示，圖中 樣品2樣品2（樣品1/樣品2）為所需基因表達載體。
| 限制酶 | 識別序列和切割位點 |
| BamHⅠ | -G′GATCC- |
| BglⅡ | -A′GATCT- |
| EcoRⅠ | -G′AATTC- |
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】A；①；使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并可以遺傳給下一代，同時使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用；Ca2+；潮霉素；BamHI和EcoRI；樣品2
【解答】
【點評】
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
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