研究者篩選到一株降解纖維素能力較強(qiáng)的枯草芽孢桿菌菌株（B菌），從中獲得一種纖維素酶（C1酶）基因。將C1酶基因與高效表達(dá)載體（HT質(zhì)粒）連接，再導(dǎo)入B菌，以期獲得降解纖維素能力更強(qiáng)的工程菌。熒光定量PCR技術(shù)可定量檢測(cè)樣本中某種DNA含量。其原理是在PCR體系中每加入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)與某條模板鏈互補(bǔ)的熒光探針，當(dāng)Taq酶催化子鏈延伸至探針處，會(huì)水解探針，使熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)接收到熒光信號(hào)，即每擴(kuò)增一次，就有一個(gè)熒光分子生成。在檢測(cè)過程中，隨著PCR的進(jìn)行，反應(yīng)產(chǎn)物不斷累積，“雜交雙鏈”熒光信號(hào)的強(qiáng)度也等比例增加?？赏ㄟ^熒光強(qiáng)度的變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖（如圖1）。
注：DNA的轉(zhuǎn)錄方向是RNA的合成方向，即5'端到3'端。
回答下列問題：
（1）啟動(dòng)子的基本組成單位是
脫氧核苷酸
脫氧核苷酸
，能識(shí)別啟動(dòng)子的酶是 RNA聚合酶
RNA聚合酶
。
（2）熒光定量PCR儀能監(jiān)測(cè)出熒光到達(dá)預(yù)先設(shè)定閾值的循環(huán)數(shù)（Ct值），病毒核酸濃度越高，Ct值越 小
小
。
（3）“平臺(tái)期”出現(xiàn)的最可能的原因是 試劑盒中的原料、引物和探針數(shù)量一定，超出一定循環(huán)數(shù)后，熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”不再增加
試劑盒中的原料、引物和探針數(shù)量一定，超出一定循環(huán)數(shù)后，熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”不再增加
。
（4）圖2中HT質(zhì)粒酶切位點(diǎn)如圖所示，C1酶基因以B鏈為轉(zhuǎn)錄模板鏈，克隆C1酶基因時(shí)在其酶切位點(diǎn)1和酶切位點(diǎn)2兩端分別添加 BamHI
BamHI
和 SmaI
SmaI
，并且二者順序不能調(diào)換的原因是 轉(zhuǎn)錄時(shí)mRNA自身延伸方向是5’→3’，使C1酶基因按照正確的方向與已被酶切的HT質(zhì)粒連接
轉(zhuǎn)錄時(shí)mRNA自身延伸方向是5’→3’，使C1酶基因按照正確的方向與已被酶切的HT質(zhì)粒連接
。
（5）預(yù)期該工程菌在處理廢棄物以保護(hù)環(huán)境方面可能的應(yīng)用 降解桔桿，減少桔桿燃燒帶來的空氣污染
降解桔桿，減少桔桿燃燒帶來的空氣污染
。（舉一例）
