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EPO是促紅細胞生成素的英文簡稱，是一種激素樣物質(zhì)，可促進體內(nèi)新紅細胞生成。人類已可通過基因工程合成EPO基因，并采用中國倉鼠卵巢（CHO）細胞表達系統(tǒng)來獲取產(chǎn)物，其過程如圖。請回答下列問題：
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（1）從人體組織中提取EPO的mRNA，在
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
酶的作用下合成EPO基因的cDNA，再通過PCR技術(shù)獲得大量EPO基因，PCR的產(chǎn)物一般通過
瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖凝膠電泳
來鑒定。進行擴增時需先加熱至90?95℃，后冷卻至55?60℃，以上調(diào)控溫度操作的目的分別是
使DNA雙鏈打開解為單鏈
使DNA雙鏈打開解為單鏈
、
使兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合
使兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合
。
（2）供體母鼠通常情況下每次排卵8?12枚，為使其超數(shù)排卵，需注射
促性腺
促性腺
 激素以排出更多的卵子，培養(yǎng)到
MⅡ中
MⅡ中
 期與獲能的精子相遇，精子穿越透明帶，完成體外受精。
（3）①過程構(gòu)建了基因表達載體，內(nèi)部包括不可缺少的組成部分，其中
啟動子
啟動子
 能驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄。切割含EPO基因的DNA與載體時通常用兩種不同限制酶的原因是
防止質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化和反向連接
防止質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化和反向連接
。
（4）采用
顯微注射
顯微注射
 技術(shù)，將重組表達載體導(dǎo)入小鼠受精卵中，將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)。當(dāng)胚胎發(fā)育至
桑葚胚或囊胚
桑葚胚或囊胚
 時期，向受體移植。
（5）若想檢驗轉(zhuǎn)基因倉鼠是否成功表達EPO，可以采用
抗原-抗體雜交
抗原-抗體雜交
 技術(shù)對血液來進行檢測。

【答案】逆轉(zhuǎn)錄；瓊脂糖凝膠電泳；使DNA雙鏈打開解為單鏈；使兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合；促性腺；MⅡ中；啟動子；防止質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化和反向連接；顯微注射；桑葚胚或囊胚；抗原-抗體雜交
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/8 8:0:9組卷：90引用：1難度：0.6
相似題

  • 1．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（　　）
    菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

  • 2．經(jīng)由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應(yīng)，嚴重時甚至危及生命，因此必須對食品中生物胺的含量進行減控。微生物來源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)模化生產(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實現(xiàn)了高效表達。
    （1）通過上述基因工程技術(shù)獲取目標(biāo)產(chǎn)物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是
     
    （填寫下列編號）。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)?；a(chǎn)目標(biāo)蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細胞
    ⑤目的基因和運載體重組構(gòu)建表達載體
    （2）在PCR過程中，引物的功能是
     
    。
    A．啟動DNA復(fù)制
    B．規(guī)定擴增區(qū)間
    C．解旋DNA雙鏈
    D．充當(dāng)復(fù)制模板
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    （3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設(shè)計的PCR引物應(yīng)為圖甲中的
     
    。
    （4）獲取目的基因后，需要和載體重組導(dǎo)入受體細胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是
     
    （填DNA或RNA/DNA或RNA）。
    （5）在常規(guī)PCR的每一輪擴增反應(yīng)中，溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    （6）若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質(zhì)粒pCLY15（圖丙中圖1）需用
     
    和
     
    切開，才能與MCO片段高效連接。
    （7）下列實驗操作中，能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，用合適的限制酶切割
    B．在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑，以克隆的顏色進行鑒別
    C．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，以此為模板進行PCR檢測
    D．將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5

  • 3．用限制酶EcoRⅤ單獨切割某普通質(zhì)粒，可產(chǎn)生14kb（1kb即1000個堿基對）的長鏈，而同時用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒，可得到三種長度的DNA片段，見圖（其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個黏性末端）。
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    若用MboⅠ限制酶單獨切割該普通質(zhì)粒，則產(chǎn)生的DNA片段的長度為（　?。?/h2>

    發(fā)布：2024/11/14 4:0:2組卷：89引用：9難度：0.7
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