刺突糖蛋白(S蛋白)是新冠病毒入侵人體細(xì)胞及決定其抗原性的關(guān)鍵蛋白質(zhì)。新冠病毒進(jìn)入人體后,S蛋白與人體細(xì)胞表面的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)結(jié)合,從而侵入細(xì)胞內(nèi),某科研團(tuán)隊(duì)利用改造的腺病毒為載體,通過基因工程的技術(shù)手段,將腺病毒的一部分基因替換成新冠病毒的S蛋白基因,進(jìn)行疫苗研發(fā)?;卮鹣铝袉栴}:
(1)選用的腺病毒需要經(jīng)過人工改造后,才能作為制備該疫苗的載體。改造后的腺病毒除了具有對宿主細(xì)胞無害、能夠在細(xì)胞中自我復(fù)制的特點(diǎn)外,還應(yīng)該具有
(一至多個(gè))限制酶切割位點(diǎn)
(一至多個(gè))限制酶切割位點(diǎn)
、標(biāo)記基因
標(biāo)記基因
等。
(2)在制備疫苗的過程中,常采用技術(shù)PCR
PCR
獲取和擴(kuò)增新冠病毒的S蛋白基因。擴(kuò)增時(shí),除了模板、四種脫氧核苷酸,還需要加入Taq酶(或耐高溫的DNA聚合酶)
Taq酶(或耐高溫的DNA聚合酶)
和引物。加入的引物需要兩種的理由是DNA的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?,DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈,用兩種引物才能確保DNA的兩條鏈同時(shí)被擴(kuò)增
DNA的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械模珼NA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈,用兩種引物才能確保DNA的兩條鏈同時(shí)被擴(kuò)增
。
(3)在將腺病毒的一部分基因替換成新冠病毒的S蛋白基因的過程中,需要用到的酶是限制酶
限制酶
和DNA連接酶
DNA連接酶
。
(4)該疫苗的前期臨床研究表明,接種疫苗后人體內(nèi)產(chǎn)生了針對S蛋白的抗體,當(dāng)新冠病毒侵染到接種過疫苗的人體內(nèi)后,無法侵入到人體細(xì)胞進(jìn)行繁殖,其原因是當(dāng)新冠病毒侵入機(jī)體后,該抗體能夠識別新冠病毒的S蛋白,并與之結(jié)合,導(dǎo)致病毒S蛋白無法和細(xì)胞表面的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)結(jié)合,病毒無法侵入人體細(xì)胞,從而失去增殖能力
當(dāng)新冠病毒侵入機(jī)體后,該抗體能夠識別新冠病毒的S蛋白,并與之結(jié)合,導(dǎo)致病毒S蛋白無法和細(xì)胞表面的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)結(jié)合,病毒無法侵入人體細(xì)胞,從而失去增殖能力
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