螢火蟲發(fā)光是體內(nèi)熒光素酶催化一系列反應(yīng)所產(chǎn)生的現(xiàn)象。如果熒光素酶存在于植物體內(nèi)，也可使植物體發(fā)光。一直以來熒光素酶的惟一來源是從螢火蟲腹部提取。但加利福尼亞大學(xué)的一組科學(xué)家成功地通過轉(zhuǎn)基因工程實(shí)現(xiàn)了將熒光素酶基因?qū)氲酱竽c桿菌體內(nèi)，并在大腸桿菌體內(nèi)產(chǎn)生熒光素酶。請你根據(jù)已有的知識回答下列有關(guān)問題：
（1）在此轉(zhuǎn)基因工程中，目的基因是

熒光素酶基因

熒光素酶基因

，將目的基因和質(zhì)?！翱p合”在一起的工具酶是

DNA連接酶

DNA連接酶

。該酶據(jù)來源可以分為兩類，其中

T₄-DNA連接酶

T₄-DNA連接酶

既可以“縫合”黏性末端，又可以“縫合”平末端。
（2）將此目的基因?qū)氲酱竽c桿菌體內(nèi)需要載體的幫助。選取載體時(shí)必須考慮的條件是

能夠在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定保存、具有特定的限制酶切割位點(diǎn)、具有與目的基因相同的堿基片段、具有某些標(biāo)記基因

能夠在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定保存、具有特定的限制酶切割位點(diǎn)、具有與目的基因相同的堿基片段、具有某些標(biāo)記基因

。（至少寫出兩點(diǎn)）。
（3）在此基因工程中，將體外重組DNA導(dǎo)入大腸桿菌體內(nèi)，并使其在細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定保存和表達(dá)的過程稱為

轉(zhuǎn)化

轉(zhuǎn)化

。最常用的方法是首先用

Ca²⁺

Ca²⁺

處理大腸桿菌得到

感受態(tài)

感受態(tài)

細(xì)胞。
（4）目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，用

DNA分子雜交

DNA分子雜交

技術(shù)來檢測。目的基因是否表達(dá)出相應(yīng)的蛋白質(zhì)，除了通過大腸桿菌是否發(fā)光來確定外，還可以通過

抗原—抗體

抗原—抗體

特異性反應(yīng)來判斷。