研究發(fā)現(xiàn)人溶菌酶（hLZ）是天然抗生素替代品?？茖W家培育出轉入溶菌酶基因山羊，可大規(guī)模生產(chǎn)人溶菌酶（從乳汁中提取）。其過程如圖所示，其中①～⑨表示過程。亮氨酸是山羊細胞維持生命活動必不可少的一種必需氨基酸，質粒S中的基因Leu通過控制相關酶的合成控制亮氨酸的合成，基因GFP控制合成綠色熒光蛋白。四種限制酶的識別序列及切割位點見下表。請回答下列問題：
| 限制酶 | BamHⅠ | BglⅡ | HindⅢ | XbaⅠ |
| 識別序列和切割位點 | -G↓GATCC- | -A↓GATCT- | -A↓AGCTT- | -T↓CTAGA- |
（1）以胞內的mRNA為模板通過反轉錄合成cDNA，將其儲存于受體菌群，從而構建
cDNA文庫（部分基因文庫）
cDNA文庫（部分基因文庫）
。過程②需要的限制酶是 BamHⅠ、HindⅢ
BamHⅠ、HindⅢ
。（2）為成功篩選出含重組質粒T的成纖維細胞，質粒S中用作標記基因的是
基因Leu、基因GFP
基因Leu、基因GFP
。為達到篩選目的，培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分中不應含有 亮氨酸
亮氨酸
。將成纖維細胞培養(yǎng)一段時間后觀察，篩選出 不顯示
不顯示
（選填“顯示”或“不顯示”）綠色熒光的細胞用于過程⑤。（3）過程④常用儀器為
顯微注射儀
顯微注射儀
。培養(yǎng)過程需對早期胚胎進行性別鑒定和胚胎分割，性別鑒定應取 滋養(yǎng)層
滋養(yǎng)層
（填“滋養(yǎng)層”或“內細胞團”）進行SRY-PCR，篩選出雌性動物胚胎并進行分割，分割時應注意 將內細胞團均等分割
將內細胞團均等分割
。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】cDNA文庫（部分基因文庫）；BamHⅠ、HindⅢ；基因Leu、基因GFP；亮氨酸；不顯示；顯微注射儀；滋養(yǎng)層；將內細胞團均等分割
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：15引用：1難度：0.6
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉基因抗鹽煙草新品種過程中應用的生物技術有（答出2項）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質粒，應該選擇（填酶）切割目的基因和質粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進行篩選。
（3）培育轉基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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